律速膜蛋白ABCA1の安定化によるHDL産生の促進機構の研究

稳定限速膜蛋白ABCA1促进HDL产生的机制研究

基本信息

批准号：
04F04499
负责人：
横山信治
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04499/
关键词：
コレステロール HDL アポリポ蛋白質リポ蛋白質 ABCA1 細胞膜プロブコール

项目摘要

本研究プロジェクトは、HDL新生に必須でありかつ律速因子である膜蛋白質ABCA1の分解制御による、転写翻訳御機構による活性調節機序を研究することにある。我々は以前から、ヘリックス型アポリポ蛋白質と細胞の相互作用によるHDL新生反応が、ABCA1を発現しないHEK293細胞ではおこらず、ABCA1またはその相似蛋白質であるABCA7を強制発現させることにより、起こることを報告した。また、HDLを低下させる薬剤プロブコールは、内因性のABCA1のHDL新生活性を阻害し、またそのカルパイン分解による制御をも阻害することを見いだした。これらの発見に基づき、この現象が、強制発現させたABCA1とABCA7にも見られるかどうかの検討を行った。まず、HEK293に発現させられたABCA1とABCA7はともにカルパイン阻害剤を含むチオール蛋白分解酵素の阻害剤により分解が抑制された。次に、プロブコールによる阻害効果を検討した。LDLに組み込んだ薬剤を細胞に投与するために、本来HEL293細胞での発現レベルが極めて低いLDL受容体遺伝子の導入を行い、プロブコールを細胞に投与することに成功した。この結果、この薬剤は、強制発現されたABCA1とABCA7にともに内因性のABCA1に対すると同じ効果を発揮し、そのHDL新生活性とカルパイン分解の両者を阻害した。この結果は、ABCA1のHDL新生活性の制御の機構に新しい知見を加え、ABCA1活性の制御によるHDL増加薬の開発に役立つものと考えられる。

本研究项目旨在通过转录翻译控制机制，通过控制膜蛋白ABCA1的降解来研究其活性调节机制，而膜蛋白ABCA1是HDL生成所必需的限速因子。我们之前报道过，由于螺旋载脂蛋白与细胞之间的相互作用而导致的HDL新生不会发生在不表达ABCA1的HEK293细胞中，而是在强制表达ABCA1或其类似蛋白ABCA7时发生。我们还发现普罗布考是一种降低 HDL 的药物，可抑制内源性 ABCA1 的 HDL 新激活活性，并抑制其通过钙蛋白酶降解的调节。基于这些发现，我们调查了在强制表达的ABCA1和ABCA7中是否也观察到这种现象。首先，HEK293 中表达的 ABCA1 和 ABCA7 的降解均受到硫醇蛋白酶抑制剂（包括钙蛋白酶抑制剂）的抑制。接下来，我们研究了普罗布考的抑制作用。为了将掺入LDL的药物施用到细胞中，他们引入了通常在HEL293细胞中以极低水平表达的LDL受体基因，并成功地将普罗布考施用到细胞中。结果，该药物对强制表达的 ABCA1 和 ABCA7 产生与内源性 ABCA1 相同的效果，并抑制 HDL 新活性和钙蛋白酶降解。这一结果为ABCA1控制HDL新活性的机制增添了新的知识，并被认为有助于开发通过控制ABCA1活性来增加HDL的药物。