脂質代謝系転写因子の複合調節による体エネルギー分配の改変

通过脂质代谢转录因子的复杂调节改变身体能量分布

基本信息

批准号：
15780179
负责人：
村井篤嗣
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

脂質代謝系はエネルギーの蓄積と分解に携わっており、蓄積と分解に働く酵素の発現を正あるいは負に調節することができれば、代謝バランスを効率良く変動させることができる。鳥類肝臓では、哺乳類には存在しない二種類の脂肪酸結合蛋白質(L型およびLb型)が存在しており、脂質系転写因子の発現を間接的に制御する。そこで、二種類の脂肪酸結合蛋白質を強制発現させた細胞培養系を用い、脂質蓄積量に如何なる変化をもたらすのかについて調査した。また、脂肪酸結合蛋白質の発現を制御する転写因子を検索し、脂肪酸結合蛋白質の発現を正あるいは負に調節することが可能かについても検討した。得られた結果の概要は以下の通りである。1)L型およびLb型脂肪酸結合蛋白質を強制発現させたBHK細胞株を作製し、細胞内の脂質含有量を調査した。2)L型脂肪酸結合蛋白質を強制発現させた細胞株で中性脂肪含量が増加したが、リン脂質およびコレステロール含量に変化は見られなかった。3)Lb型脂肪酸結合蛋白質を強制発現させた細胞株では何れの脂質成分含量にも変化は見られなかった。したがって、両脂肪酸結合蛋白質のうちL型のみがエネルギー蓄積を正に制御していることが判明した。4)両脂肪酸結合蛋白質のプロモーター領域を含むレポーター遺伝子を培養細胞へ導入し、それらの転写を制御する要因について調査した。5)核内転写因子であるニワトリPPAR-αを強制発現させるとともに、脂溶性リガンドであるETYAを添加した所、L型では発現が強く誘導されたが、Lb型では変化が見られなかった。6)ニホンウズラ肝臓におけるPPAR-αと両FABPの発現量の相関関係を調査した所、L型では強い正の相関が観察されたのに対し、Lb型での相関は弱いものであった。7)以上より、鳥類におけるL型脂肪酸結合蛋白質の発現量はPPAR-αにより調節を受けるとともに、このL型脂肪酸結合蛋白質の発現量を変化させることにより脂質蓄積量を調節することが可能であるこを示した。

脂质代谢系统参与能量的储存和分解，如果能够正向或负向调节发挥储存和分解作用的酶的表达，就可以有效改变代谢平衡。禽类肝脏含有哺乳动物中不存在的两种脂肪酸结合蛋白（L型和Lb型），间接控制脂质转录因子的表达。因此，我们使用了一种强制表达两种脂肪酸结合蛋白的细胞培养系统，并研究了这会给脂质积累量带来什么样的变化。我们还寻找控制脂肪酸结合蛋白表达的转录因子，并研究是否有可能正向或负向调节脂肪酸结合蛋白的表达。所得结果总结如下。 1)我们创建了强制表达L型和Lb型脂肪酸结合蛋白的BHK细胞系，并研究了细胞内的脂质含量。 2)在被迫表达L型脂肪酸结合蛋白的细胞系中，中性脂肪含量增加，但磷脂和胆固醇含量没有观察到变化。 3)在强制表达Lb型脂肪酸结合蛋白的细胞系中，没有观察到任何脂质成分的含量变化。因此，表明在两种脂肪酸结合蛋白中，只有L型对能量储存有正向调节作用。 4）我们将含有两种脂肪酸结合蛋白启动子区域的报告基因引入培养细胞中，并研究控制其转录的因素。 5)当强制表达鸡核转录因子PPAR-α并添加脂溶性配体ETYA时，在L型中强烈诱导表达，但在Lb型中未观察到变化。 6）当我们研究日本鹌鹑肝脏中PPAR-α和两种FABP的表达水平之间的相关性时，在L型中观察到强正相关，而在Lb型中观察到弱相关。 7) 由上可知，鸟类中L型脂肪酸结合蛋白的表达水平受PPAR-α调节，通过改变这种L型脂肪酸结合蛋白的表达水平，可以调节脂质积累量。蛋白质显示。