ナノ組織化されたバイオ分子を用いた超高感度光学式免疫センサの開発

利用纳米组织生物分子开发超灵敏光学免疫传感器

基本信息

批准号：
03F03086
负责人：
三浦則雄
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、高感度かつ高選択的でありながら、安価で簡便な検出が可能な免疫反応を利用したイムノアッセイと計測装置とを組み合わせたセンシングシステムについて、表面修飾技術やマイクロチャネル作製技術を駆使することにより、検出が難しい環境中などに存在する低分子化合物を超高感度、高選択的、しかもオンサイトで簡便に多成分同時検出が可能な新しいセンシングシステムを構築することを目的として研究を進めた結果、今年度は以下のような成果を得た。1)サブppbレベルの環境汚染物質のリアルタイム高感度検出タンパクコンジュゲートを金膜上に固定化したSPRセンサにより、間接競合法を用いて、0.1ppb程度の2-ヒドロキシビフェニルを応答時間が約20分で高感度検出できることがわかった。また、この免疫センサ素子はペプシン溶液により20回以上再生して使用することが可能であった。2)マルチチャネルチップを用いたコンパクトでポータブルなSPR免疫センサによる低分子化合物の同時検出4つのマイクロチャネルを用いたコンパクト(16×9×6cm)で軽量のSPRセンサを作製し、ベンゾ(a)ピレンと2-ヒドロキシビフェニルを高感度で同時検出することに成功した。3)単分子タンパク質膜を用いた免疫センサによる環境ホルモンの迅速検出環境ホルモンの一種である2,4-ジクロロフェノキシ酢酸(2,4-D)のトレースレベルの検出を、2,4-D-BSAバイオ単分子膜を形成したセンサチップを用いることにより、SPRセンサにより0.5ppbまで検出できることがわかった。

在这项研究中，我们将利用表面改性技术和微通道制造技术来开发一种传感系统，该系统结合了测量装置和免疫测定，该免疫测定使用高度灵敏和选择性的免疫反应，但可以轻松且低成本地检测。这是旨在构建一种超灵敏、高选择性的新型传感系统的研究成果，该系统可以轻松地现场同时检测难以检测环境中存在的低分子量化合物。今年，我们取得了以下成果。 1) 实时、高灵敏度检测亚 ppb 级环境污染物使用金膜上固定有蛋白缀合物的 SPR 传感器，可检测约 0.1 ppb 的 2-羟基联苯，响应时间约为 20发现间接竞争法可以在几分钟内完成高灵敏度的检测。此外，这种免疫传感器元件可以再生并与胃蛋白酶溶液一起使用20次以上。 2）使用多通道芯片的紧凑型便携式SPR免疫传感器同时检测低分子量化合物我们成功地以高灵敏度同时检测芘和2-羟基联苯。 3) 使用单分子蛋白膜的免疫传感器快速检测环境激素检测微量水平的环境激素2,4-二氯苯氧基乙酸（2,4-D），发现通过使用形成的传感器芯片借助 BSA 生物单层，SPR 传感器可以检测高达 0.5 ppb 的浓度。