有効な腫瘍拒絶反応を惹起しうるHER2/neuヘルパーT細胞エピトープの同定

鉴定可诱导有效肿瘤排斥的 HER2/neu 辅助 T 细胞表位

基本信息

批准号：
14770091
负责人：
小林博也
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770091/
关键词：
HER2 neu ペプチドヘルパーT細胞 HLA 腫瘍免疫

项目摘要

2名の健常人末梢血から、HER2/neu410-423とHER2/neu1208-1221に強く反応するCD4陽性のヘルパーT細胞株を樹立し、これらからT細胞クローンを得て詳細な解析を行った。これらのHER2ペプチド特異的T細胞は、それぞれのペプチドを日本人に多く認められるHLA-DR9を介して認識した。トランケイトペプチドを作製しT細胞エピトープのcore sequence(責任抗原部位)の同定を行った所、HER2/neu410-423ペプチド特異的ヘルパーT細胞クローンは、411番目から421番目の配列を、HER2/neu1208-1221特異的ヘルパーT細胞クローンは1211番目から1217番目の配列に対して有意に増殖し、これらのアミノ酸配列がT細胞の増殖に重要な部分と考えられた。新たに同定されたHER2エピトープペプチドが、癌ペプチドワクチンとして臨床応用されるには、これらのペプチドが自然な形で(naturally processed antigen)抗原提示細胞を介して特異的T細胞に提示されることを示す必要がある。HER2/neu陽性の乳癌細胞株MCF7のfreeze/thaw lysateを調整してこれを抗原提示細胞にパルスし、樹立したHER2ペプチド特異的ヘルパーT細胞クローンと共培養した。いずれのT細胞もコントロールの抗原提示細胞には反応しなかったが、MCF7をパルスしたものには有意に反応し上清中に大量のIFN-γを産生した。本研究で同定されたHER2/neu410-423,HER2/neu1208-1221は日本人に高頻度で認められるアリルHLA-DR9に結合し、HER2陽性腫瘍に対してTH1タイプのTヘルパー細胞を誘導することが示唆された。現在までに報告されているCTLエピトープペプチドと組み合わせることで、より有効な癌ペプチドワクチン療法の開発が期待される。

我们从两个健康个体的外周血中建立了与 HER2/neu410-423 和 HER2/neu1208-1221 强烈反应的 CD4 阳性辅助 T 细胞系，并从中获得了 T 细胞克隆用于详细分析。这些 HER2 肽特异性 T 细胞通过 HLA-DR9 识别每种肽，HLA-DR9 在日本人中很常见。创建截短肽来识别 T 细胞表位的核心确定序列（责任抗原位点）后，HER2/neu410-423 肽特异性辅助 T 细胞克隆具有第 411 至 421 序列，HER2/neu1208-1221 肽特异性辅助 T 细胞克隆具有第 1211 序列。对位置1217至1217的序列有显着的增殖反应，并且这些氨基酸序列被认为对于T细胞增殖很重要。为了将新鉴定的HER2表位肽作为癌症肽疫苗应用于临床，需要将这些肽以天然形式（天然加工的抗原）通过抗原呈递细胞呈递给特定的T细胞。制备 HER2/neu 阳性乳腺癌细胞系 MCF7 的冷冻/解冻裂解物，脉冲至抗原呈递细胞，并与已建立的 HER2 肽特异性辅助 T 细胞克隆共培养。没有一个 T 细胞与对照抗原呈递细胞发生反应，但它们对用 MCF7 脉冲的细胞发生显着反应，并在上清液中产生大量 IFN-γ。本研究中鉴定出的 HER2/neu410-423 和 HER2/neu1208-1221 与 HLA-DR9 等位基因（在日本人中常见）结合，并诱导 TH1 型 T 辅助细胞对抗 HER2 阳性肿瘤。通过将其与迄今为止报道的CTL表位肽相结合，预计将开发出更有效的癌症肽疫苗疗法。