難治性前立腺癌に対する細胞免疫治療に必要なヘルパーT細胞エピトープペプチドの同定

难治性前列腺癌细胞免疫治疗所需的辅助 T 细胞表位肽的鉴定

基本信息

批准号：
16790220
负责人：
小林博也
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

前立腺癌の免疫治療に有効な標的抗原として、six-transmembrane epithelial antigen of the prostate(STEAP)とWT1に注目して、その蛋白の腫瘍中の発現と、これらの分子に特異的なヘルパーT細胞の反応性について検討した。STEAP及びWT1の蛋白レベルの発現をウエスタンブロット法で検討した。前立腺癌細胞株(LNCaP,PC3,LAPC4,DU145)にはSTEAP及びWT1がいずれも発現しており、前立腺癌に対する免疫細胞治療の標的抗原になりうることが示された。更に興味深いことには、STEAPはメラノーマ細胞株やメラノーマ生検材料にも発現が認められた。このことは、STEAPが前立腺癌のみならずメラノーマ抗原としても機能することが示唆された。健常成人からリンパ球を単離し、これら分子に対する細胞性免疫反応を観察した。STEAP,WT1の全アミノ酸配列からアルゴリズム解析ソフトを用いて、個人間のHLA class II抗原に制約を受けずに多数のHLA class II抗原分子に結合可能なことが予測された15残基のペプチドをSTEAP,WT1から各々2個ずつ合成した。健常人末梢血から分離したCD4陽性T細胞と樹状細胞をペプチドの存在下で共培養し、その後複数回の刺激を行ってSTEAP,WT1ペプチド特異的ヘルパーT細胞ラインを5名の健常成人から樹立した。詳細なエピトープ解析からSTEAP102-116ペプチドはHLA-DR1,DR9,DR53拘束性に、STEAP192-206ペプチドはHLA-DR1,DR9,DR53拘束性に、WT1124-138ペプチドはHLA-DR53拘束性に、WT1247-261ペプチドはHLA-DR1,DR15拘束性にヘルパーT細胞を活性化させ、IFN-γあるいはGM-CSFなどのTH1サイトカインを分泌させた。またこれらのペプチドは複数のHLA-DR分子に結合してヘルパーT細胞を誘導したことから、promiscuousエピトープペプチドであることが示された。樹立されたヘルパーT細胞ラインは、いずれもSTEAP,WT1を発現する前立腺癌細胞株あるいはメラノーマ細胞株をHLA-DR分子を介して認識しサイトカインを分泌した。このことは、今回明らかにされたSTEAP並びにWT1エピトープペプチドは、生体内で自然な形態で発生しうるnaturally processed antigenic peptideであり、これらの分子を標的とする癌ペプチドワクチンの設計に寄与するものと考えられた。

我们重点关注前列腺六跨膜上皮抗原（STEAP）和WT1作为前列腺癌免疫治疗的有效靶抗原，并研究了这些蛋白质在肿瘤中的表达以及对这些分子具有特异性的辅助T细胞的反应性。检查了。通过Western blotting检测STEAP和WT1的蛋白水平表达。 STEAP和WT1均在前列腺癌细胞系（LNCaP、PC3、LAPC4、DU145）中表达，表明它们可以作为前列腺癌免疫细胞治疗的靶抗原。更有趣的是，STEAP 也在黑色素瘤细胞系和黑色素瘤活检组织中表达。这表明STEAP不仅可以作为前列腺癌抗原，还可以作为黑色素瘤抗原。我们从健康成年人中分离出淋巴细胞，并观察对这些分子的细胞免疫反应。利用算法分析软件从STEAP,WT1的整个氨基酸序列出发，我们创建了一种15个残基的肽，预计能够与大量的HLA II类抗原分子结合，而不受个体之间HLA II类抗原的限制由STEAP和WT1各合成两个。从健康个体外周血中分离出的 CD4 阳性 T 细胞和树突状细胞在肽存在下共培养，然后多次刺激，从 5 名健康成年人中建立了 STEAP，WT1 肽特异性辅助 T 细胞系。。详细表位分析显示，STEAP102-116 肽是 HLA-DR1、DR9、DR53 限制性肽，STEAP192-206 肽是 HLA-DR1、DR9、DR53 限制性肽，WT1124-13 是 HLA-DR1、DR9、DR53 限制性肽。 8肽以HLA-DR53限制性方式激活辅助T细胞，WT1247-261肽以HLA-DR1和DR15限制性方式激活辅助T细胞，导致它们分泌TH1细胞因子，例如IFN-γ或GM -脑脊液。此外，这些肽被证明是混杂的表位肽，因为它们与多个 HLA-DR 分子结合并诱导辅助 T 细胞。建立的辅助T细胞系均通过HLA-DR分子识别表达STEAP和WT1的前列腺癌细胞系或黑色素瘤细胞系并分泌细胞因子。这表明最近澄清的STEAP和WT1表位肽是天然加工的抗原肽，可以在体内自然产生，并且将有助于针对这些分子的癌症肽疫苗的设计。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Defining MHC class II T helper epitopes for WT1 tumor antigen

定义 WT1 肿瘤抗原的 MHC II 类 T 辅助表位

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
Hiroya Kobayashi
通讯作者：
Hiroya Kobayashi

Recognition of Prostate and Breast Tumor Cells by Helper T Lymphocytes Specific for a Prostate and Breast Tumor-Associated Antigen, TARP

前列腺和乳腺肿瘤相关抗原 (TARP) 特异性辅助 T 淋巴细胞对前列腺和乳腺肿瘤细胞的识别

DOI：
10.1158/1078-0432.ccr-04-2238
发表时间：
2005-05-15
期刊：
Clinical Cancer Research
影响因子：
11.5
作者：
Hiroya Kobayashi;T. Nagato;K. Oikawa;Keisuke Sato;S. Kimura;N. Aoki;R. Omiya;M. Tateno;E. Celis
通讯作者：
E. Celis