Tヘルパー1細胞の血管内皮透過におけるCD44-PKCζシグナル経路の解明

阐明辅助 T 细胞 1 细胞血管内皮渗透中的 CD44-PKC z 信号通路

基本信息

批准号：
14770045
负责人：
片貝智哉
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770045/
关键词：
Th1細胞血管内皮透過 CD44 PKCζ 細胞極性

项目摘要

種々の慢性炎症に重要な役割を果たすTh1細胞の組織遊走過程、血管内皮透過過程を詳細に解析するために、試験管内において均一な抗原特異性を有するマウス由来のTh1細胞株を樹立し、マウス血管内皮細胞株F-2を用いた再現性のある経内皮透過実験系を確立した。この実験系を用いた解析により、Th1細胞にはケモカインに依存した経内皮透過能と依存しない経内皮透過能があり、両活性がTh1細胞優位な組織浸潤の悪循環を引き起している可能性を示した。また、Th1細胞細胞が発現するLFA-1やCD44といった接着分子を介した血管内皮細胞への接着が重要であり、特に細胞表面のCD44分子架橋刺激がTh1細胞形態を大きく変化させ、細胞遊走を誘導していることが明らかになった。Th1細胞に対する種々の薬剤処理により、この過程にはPI3K、PLC、SrcPTK等のシグナル伝達分子が関与し、アクチン細胞骨格の再編を引き起すことが示唆された。さらに、CD44分子架橋刺激は、特に細胞極性が際立った特有の細胞伸長変化をもたらし、実際の血管内皮透過におけるTh1細胞の遊走にも細胞極性の形成が極めて重要な過程であることがはっきりした。したがって、ケモカイン非依存的かつ接着依存的なシグナルがTh1細胞の経内皮透過過程に重要な役割を担っていることが示唆された。一方で、実験的に扱い易いリンフォーマ細胞株に対して安定遺伝子導入を行い、シグナル伝達経路に関係する分子の様々な変異体について、細胞遊走や形態変化への影響をを観察する系を確立するした。

为了详细分析在各种慢性炎症中发挥重要作用的Th1细胞的组织迁移过程和血管内皮渗透过程，我们在体外建立了具有一致抗原特异性的小鼠来源的Th1细胞系。使用血管内皮细胞系F-2的渗透实验系统。使用该实验系统的分析表明，Th1细胞具有趋化因子依赖性和趋化因子非依赖性的跨内皮渗透能力，并且这两种活性都可能导致Th1细胞主导的组织侵袭的恶性循环。此外，Th1细胞表达的LFA-1和CD44等粘附分子与血管内皮细胞的粘附也很重要，特别是刺激细胞表面CD44分子的交联会显着改变Th1细胞的形态并抑制细胞迁移。很明显，他正在被引导。用各种药物处理 Th1 细胞表明，信号转导分子（如 PI3K、PLC 和 SrcPTK）参与了这一过程，导致肌动蛋白细胞骨架的重组。此外，CD44分子交联的刺激带来了细胞伸长的独特变化，特别是细胞极性的变化，并且很明显，细胞极性的形成是实际血管内皮渗透过程中Th1细胞迁移的极其重要的过程。因此，提示趋化因子非依赖性和粘附依赖性信号在Th1细胞的跨内皮渗透过程中发挥重要作用。另一方面，我们建立了一个系统，将基因稳定地引入到易于实验操作的淋巴瘤细胞系中，并观察与信号转导途径相关的分子的各种突变体对细胞迁移和形态变化的影响。