末梢神経損傷後の神経栄養因子の発現および脱神経筋の機能回復に関する研究

周围神经损伤后失神经肌肉神经营养因子表达及功能恢复的研究

• 批准号: 14770738
• 负责人: 榊間 春利
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770738/
• 关键词: 神経栄養因子; ミッドカイン; 末梢神経損傷; 外傷性脊髄損傷; 機能回復; リハビリテーション; In situ hybridizaion; 脱神経筋; 免疫組織化学; 組織化学

1.末梢神経損傷後の骨格筋(タイプI線維)の萎縮に対する伸張刺激の影響、ラットの右坐骨神経をヒラメ筋進入部から約20mmの部位で凍結損傷して一過性の末梢神経障害モデル動物を作製した。凍結損傷は、切断や圧迫損傷と異なり、再生しやすく、今回、凍結後2〜3週で神経の再生が観察された。凍結4週後まで毎日、40分間ラットの右足関節を最大背屈位に固定してヒラメ筋に伸張刺激を与え、ヒラメ筋を組織化学的に分析した結果、伸張刺激が脱神経筋であるヒラメ筋のタイプI繊維の筋萎縮を抑制することが分かった。しかし、タイプII線維の萎縮は抑制できなかった。さらに、再生過程におけるヒラメ筋の筋線維タイプ構成に影響を及ぼすことが判明した。しかし、伸張刺激は末梢神経の再生を促進するには至らなかった。2.末梢神経損傷後や外傷性脊髄損傷後の神経栄養因子ミッドカイン(MK)の発現と働き成長因子MKは塩基性の低分子量蛋白質で、細胞の増殖、生存、移動を促進刷るなどの多彩な活性をもつ。今回、末梢神経障害後や脊髄損傷後のMKの発現や役割に関して調べた。(1)末梢神経損傷後のMKの発現につてラットの右坐骨神経を凍結損傷して末梢神経障害モデル動物を作製し、凍結5週後まで腰髄運動ニューロンと坐骨神経を観察した。免疫組織化学染色、In situ hybridization、ウエスタンブロッティング法を行った結果、腰髄運動ニューロンにMKの発現が観察された。さらに、MK mRNAの発現は凍結1〜7日まで損傷側腰髄運動ニューロンに強く発現し、反対側にも弱く発現していた。ウエスタンブロッティング法によりMK陽性細胞がMK蛋白であることを確認した。(2)外傷性脊髄損傷後のMKの発現について外傷性脊髄損傷モデルを作製し、損傷後早期にMKが発現し、発現細胞はアストロサイトであるこが判明した。

1.拉伸刺激对周围神经损伤后骨骼肌（I型纤维）萎缩的影响，大鼠右侧坐骨神经距比目鱼肌入口处约20mm处冻伤的短暂性周围神经病变模型一只动物被创造了。与截肢或压缩损伤不同，冷冻损伤很容易再生，在这项研究中，在冷冻后 2 至 3 周观察到神经再生。将大鼠的右脚踝每天固定在最大背屈位置40分钟，直至冷冻后4周，并对比目鱼肌施加拉伸刺激。对比目鱼肌的组织化学分析结果发现，研究发现，对比目鱼肌（一种去神经肌肉）施加拉伸刺激可以抑制肌肉中的 I 型纤维萎缩。然而，II型纤维萎缩无法被抑制。此外，还发现它在再生过程中影响比目鱼肌的肌纤维类型组成。然而，牵拉刺激并不能促进周围神经再生。 2.周围神经损伤或创伤性脊髓损伤后神经营养因子中期因子（MK）的表达和功能生长因子MK是一种基本的、低分子量的蛋白质，具有多种功能，包括促进细胞增殖、存活和生长。它有很多活动。在这里，我们研究了周围神经病变和脊髓损伤后 MK 的表达和作用。 (1)关于周围神经损伤后MK的表达，通过冷冻大鼠右侧坐骨神经制作周围神经病模型动物，观察腰脊髓运动神经元和坐骨神经直至冷冻后5周。免疫组织化学染色、原位杂交和Western blotting结果显示，腰脊髓运动神经元中观察到MK表达。此外，冷冻后1～7天，MK mRNA在损伤侧腰脊髓运动神经元中强表达，而对侧也弱表达。 Western blotting证实MK阳性细胞含有MK蛋白。 (2)关于创伤性脊髓损伤后MK的表达，我们建立了创伤性脊髓损伤模型，发现MK在损伤后早期就有表达，表达细胞为星形胶质细胞。