微細構造形成表面プラズモン共鳴チップの原理検証

微结构形成表面等离子体共振芯片原理验证

基本信息

批准号：
21651062
负责人：
大平文和
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Kagawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

表面プラズモン共鳴(SPR)センシング技術により、チップ表面にミクロンサイズの微細な凹凸を形成することにより、従来は出来なかった寸法による弁別を可能とし、これにより細胞の変化や薬物反応をリアルタイムかつ非修飾でセンシングする技術の提案と原理検証を行った。1.酵母細胞の様態変化の測定。酵母細胞は時間経過に伴い様態が変化する。時間変化に伴う死滅等によって分泌物を出すため、これをチップ上の微細構造物によりフィルタ効果で選別することを試みた。酵母細胞自体は寸法が大きい(約10μm)ため検出されないが分泌物により、SPR角度が時間とともに変化することを検出できた。これにより、様態変化をモニタリングすることが出来ることを明らかにした。2.膜細胞の薬物透過測定。本チップ上に膜細胞を張りこれを薬物が透過するか否かを、微細構造形成チップで検出することによりその透過特性の判断を行なうことを試行した。膜細胞を微細構造上に均一に形成することが困難であるためSPRの測定を行う段階までは至らなかったが、膜細胞を形成する課題等を明らかに出来た。3.物質の凝集・脱凝集の評価。凝集のモデルサンプルとしてSGNP(金ナノ粒子に糖鎖が固定化されたもの)を用いて、凝集評価及び糖の脱凝集能評価を行った。これは、糖鎖と結合するたんぱく質(凝集素)を加えると短時間で凝集する。また、この凝集体に凝集を阻害する糖を加えると凝集が解消される。本実験では凝集素にヒマ豆レクチン、阻害糖にラクトースを用いた。その結果、フィルターSPRチップではフィルター効果によって凝集した物質は検出されなくなり、凝集の有無を判別することが可能であることが分かった。また、フィルターSPRチップを用いることで阻害糖による脱凝集の評価も可能であることを示した。

通过使用表面等离子体共振（SPR）传感技术在芯片表面形成微米大小的不规则性，可以区分以前无法的尺寸，通过这种情况，我们提出了一种实时和未修饰方式传感细胞变化和药物反应的技术，并验证了原则。 1。测量酵母细胞的面部变化。酵母细胞的状态会随着时间而变化。为了由于时间变化而释放分泌物，我们试图通过使用芯片上的微观结构使用过滤器效应来选择这些分泌物。酵母细胞本身的大小较大（约10μm），但是可以检测到由于分泌物而导致的SPR角度随时间变化。这表明可以监视形式的变化。 2。膜细胞药物渗透测量。我们试图通过检测芯片上膜细胞的渗透特性来确定该药物是否可以渗透，以确定该药物是否可以渗透。尽管很难在微观结构上均匀形成膜细胞，但不可能测量SPR，但是清楚地揭示了形成膜细胞的问题。 3。材料聚集和分解的评估。使用SGNP（一种将糖链固定在金纳米颗粒上）作为聚集的模型样本评估了聚集评估和糖脱缘型能力。当添加与糖链结合的蛋白质（葡萄糖素）时，这会导致聚集。此外，添加抑制聚集的糖会消除聚集。在该实验中，蓖麻凝集素用作凝集素，乳糖用作抑制糖。结果，发现由于过滤器效应，滤波器SPR芯片未检测到任何聚集的物质，并且可以确定是否存在聚集。此外，已经表明，使用过滤器SPR芯片也可用于评估由抑制性糖引起的脱缘物。