ショウジョウバエにおける抗ウイルス自然免疫分子機構の解析

果蝇抗病毒先天免疫分子机制分析

基本信息

批准号：
10J05695
负责人：
石川裕規
金额：
$ 4.8万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J05695/
关键词：
自然免疫ショウジョウバエバキュロウイルス

项目摘要

自然免疫は、細胞が病原体由来の分子構造を認識し、病原体を排除する生体防御機構である。近年の研究により、自然免疫に関わる様々な因子が同定されているが、そのシグナル伝達および病原体排除機構において未知の部分が多く残っている。そこで、本研究では、自然免疫の包括的な理解を目指して、DNAウイルス感染に対する自然免疫の制御因子を同定する。具体的には、モデル生物であるショウジョウバエのゲノムワイドRNAiライブラリーを用いて、昆虫特異的DNAウイルスであるバキュロウイルスの増殖抑制に関わる宿主因子の探索を行なった。前年度までに、バキュロウイルスにLuciierase遺伝子を組み込んだ組換えウイルスをレポーターウイルスとして用いて、レポーター遺伝子発現に影響を与える因子をRNAiスクリーニングにより探索した。その結果、複数のヒストンメチル化酵素の遺伝子発現抑制によりバキュロウイルス遺伝子発現が大幅に増強されることが明らかとなり、バキュロウイルスの遺伝子発現がヒストンメチル化により抑制されていることが示唆された。ヒストンメチル化を介したウイルス遺伝子発現抑制が哺乳動物においても保存されていることを確認するために、Hela細胞およびHek293細胞において同定されたヒストンメチル化酵素の遺伝子発現を抑制したところ、バキュロウイルスの遺伝子発現が増強され、哺乳動物においてもヒストンメチル化を介したウイルス遺伝子発現抑制が保存されていることが示された。現在はこのヒストンメチル化酵素がウイルス遺伝子発現を抑制するメカニズムを解明するために、クロマチン免疫沈降により本酵素がウイルスゲノム上のピストンのメチル化状態に与える影響を調べている。

先天免疫是一种生物防御机制，其中细胞识别源自病原体并消除病原体的分子结构。最近的研究已经确定了与先天免疫有关的各种因素，但是许多未知数仍然存在于其信号传导和病原体排除机制中。因此，本研究旨在提供对先天免疫力的全面理解，并确定对DNA病毒感染的先天免疫调节剂。具体而言，我们使用了模型生物体果蝇的全基因组RNAi库来寻找抑制杆状病毒生长的宿主因素，抑制昆虫特异性DNA病毒的生长。直到上一年，将Lucierase基因纳入杆状病毒中的重组病毒被用作记者病毒，以寻找影响RNAi筛查的报道基因表达的因素。结果，据揭示了杆状病毒基因表达通过抑制多种组蛋白甲基酶的基因表达显着增强，这表明杆状病毒基因表达被组蛋白甲基化抑制。为了确认通过组蛋白甲基化对病毒基因表达的抑制在哺乳动物中是保守的，当抑制了在HELA和HEK293细胞中鉴定的组蛋白甲基酶的基因表达，抑制了细菌病毒的基因表达增强，并且通过组蛋白甲基化的病毒基因表达的抑制是保存的。目前，为了阐明这种组蛋白甲基酶抑制病毒基因表达的机制，我们正在研究该酶对活塞甲基化态对活塞对病毒基因组的甲基化态对病毒基因组的影响。