脳特異タンパク質で新規に見出されたミリスチル化によるタンパク質間相互作用の制御

在大脑特异性蛋白质中新发现的肉豆蔻酰化调节蛋白质-蛋白质相互作用

基本信息

批准号：
13770064
负责人：
林宣宏
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Fujita Health University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

脳に特異的に発現しているNAP22と細胞内シグナル伝達系の主要因子カルモジュリンとの相互作用がミリスチル化により制御される新規のタンパク質間相互作用であることを見い出し、その分子機構を^1H-NMR、溶液X線小角散乱、CD、蛍光スペクトルの実験データをもとにしたバイオインフォマティックスにより解析している。これまでにこの相互作用が、1)ミリスチル基依存的であること、2)リン酸化により抑制されること、3)モル比が2:1の複合体を形成すること、また、複合体形成時に、4)カルモジュリン結合部位が既知の複合体で見られるようなαヘリックスを形成していないこと、5)慣性半径が既知のそれよりも大きいこと、などを明らかにした。現在は、NAP22とカルモジュリンの相互作用が脳内におけるシグナル伝達系の制御にどのように関与しているのかに着目して研究を進めている。また、srcがん遺伝子産物とHIV nef遺伝子産物では実験的にミリスチル化が示されているが、両者に関してもNAP22と同様の機能制御が存在することを見い出し、その分子機構、および生理作用、特に細胞がん化とエイズの発症の分子機構の解明を念頭に、研究を進めている。さらに、ゲノムデータを用いたバイオインフォマティックスにより生体内でミリスチル化が予測されるタンパク質をリストアップし、実際にそれらのタンパク質がカルモジュリンと相互作用するかについての網羅的解析を開始した(Bioinformatics Group, Institute of Molecular Pathology(Austria)との共同研究)。

我们发现在大脑中特异性表达的NAP22与细胞内信号转导系统中的主要因子钙调蛋白之间的相互作用是一种受肉豆蔻酰化调节的新型蛋白质-蛋白质相互作用，并对其分子机制进行了研究和分析。使用基于 NMR、溶液 X 射线小角散射、CD 和荧光光谱实验数据的生物信息学。到目前为止，已经表明这种相互作用是 1) 肉豆蔻基依赖性，2) 被磷酸化抑制，3) 形成摩尔比为 2:1 的复合物，并且当复合物形成时，4) 钙调蛋白结合位点不形成已知复合物中所见的α-螺旋，并且5)回转半径比已知复合物大。目前，我们正在进行的研究重点是NAP22和钙调蛋白之间的相互作用如何参与大脑信号转导系统的调节。此外，实验表明肉豆蔻酰化发生在src癌基因产物和HIV nef基因产物中，我们发现两者都存在与NAP22相同的功能调控，我们研究了两者的分子机制和生理效应，特别是我们正在进行研究，旨在阐明细胞癌变和艾滋病发病的分子机制。此外，通过使用基因组数据的生物信息学，我们列出了预计在体内肉豆蔻基化的蛋白质，并开始全面分析这些蛋白质是否实际上与钙调蛋白相互作用（生物信息学组与分子病理学研究所（奥地利）联合研究）。