網羅的遺伝子発現解析を用いた食道癌に対する化学療法の感受性予測診断に関する研究

综合基因表达分析预测食管癌化疗敏感性的研究

基本信息

批准号：
21791286
负责人：
牧野知紀
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21791286/
关键词：
免疫組織染色 RT-PCR DNAマイクロアレイ蛋白発現解析抗癌剤耐性

项目摘要

治療前食道癌生検サンプル25例のDNAマイクロアレイによる網羅的遺伝子解析データより、化学療法の奏効群と非奏効群との間での発現差から化学療法感受性に関与する候補遺伝子を16遺伝子同定した。それらの個々の遺伝子に着目し、免疫組織染色法による蛋白発現解析を中心とした方法でそれらの分子の治療前生検サンプルや切除サンプルにおける発現状況と予後、化学療法効果との相関を検討した。16遺伝子中2遺伝子(サイトケラチン8/18、DKK1)においては、これらの蛋白の高発現症例は低発現症例より有意に予後不良であり多変量解析でも独立予後因子となったことから、食道癌における有望な新規生物学的マーカーであり今後食道癌治療戦略に寄与しうる可能性も示唆された(それぞれ2009年に論文掲載)。また、このうちサイトケラチン18については治療前食道癌生検サンプルにおいて非奏効例は奏効例よりもサイトケラチン18の発現頻度が高く、また化学療法後の残存腫瘍にも高発現していたことから抗癌剤耐性への関与が示唆された。一方で、16遺伝子中の1つであるトランスポーターXについてはこれまで卵巣癌におけるCDDP耐性が報告されているが、今回食道扁平上皮癌細胞株を用いたin vitroでの解析においても、siRNAによる発現抑制実験より5-FU、CDDPにおいて細胞株の抗癌剤感受性が増強することが明らかになったことから食道癌においても抗癌剤耐性への関与が示唆された。なお、このトランスポーターXについてはその正常組織における発現状況(遺伝子多型の有無)が抗癌剤感受性や副作用の程度に関与するという報告がなされている。食道癌患者血清でのmRNA発現と化学療法効果・副作用を解析において、化学療法後の血清mRNA発現が治療前のそれよりも上昇傾向にあることを見出している。

基于使用25个预处理食管癌活检样本的DNA微阵列的全面遗传分析数据，根据反应组与无反应化学疗法的无反应组之间的差异表达，鉴定了16个参与化学疗法敏感性的候选基因。为了关注这些单个基因，我们使用一种针对蛋白质表达分析的方法，使用免疫组织化学染色来研究这些分子在预处理活检样品和切除样品中的表达状态以及预后和化学疗法的效果之间的相关性。 In two of the 16 genes (cytokeratin 8/18, DKK1), cases of high expression of these proteins had significantly worse prognosis than cases of low expression, and were independent prognostic factors even in multivariate analysis, suggesting that they are promising novel biological markers in esophageal cancer and may contribute to esophageal cancer treatment strategies in the future (papers published in 2009, respectively).此外，其中，在预处理食管癌症活检样本中，细胞角蛋白18在无反应性食管癌活检中比在反应的情况下更为常见，并且在化学治疗后在残留肿瘤中也高度表达其参与抗癌药物耐药性。另一方面，以前据报道，转运蛋白X是卵巢癌的CDDP耐药性，但是使用食道鳞状细胞癌细胞系进行了体外分析，据揭示了细胞系的抗癌药物敏感性在5-FU和CDDP中增强了使用Sirla unterancer compartiment conserain compartiment conserver comprient sisherver conserver complient conserver comprient sisherver inservers inserver inserver inserver inserver inserver inserver inserveem inserve comploce。据报道，转运蛋白X的正常组织中的表达状态（存在或不存在遗传多态性）参与抗癌药物的敏感性和副作用程度。在分析血清血清食管癌患者的mRNA表达和化学疗法作用和副作用时，已经发现，化学疗法后的血清mRNA表达与治疗前的趋势更高。