PDIが関わるフェノール性環境化学物質の脳神経系作用機序の解明

阐明与PDI相关的酚类环境化学物质在大脑和神经系统中的作用机制

基本信息

批准号：
09J08400
负责人：
橋本翔子
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kwansei Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J08400/
关键词：
環境化学物質ビスフェノールA protein disulfide isomerase 甲状腺ホルモン

项目摘要

PDIの生理機能解析今年度は、PDIの生理機能解析に大きな進展を得ることができた。T3依存的に甲状腺ホルモン受容体(TR)を介して成長ホルモン(GH)が誘導される脳下垂体腫瘍由来細胞(GH3)において、PDIを過剰発現させると、T_3応答(GHの転写誘導)が抑制されることが明らかにされている。そこで、そのメカニズムを調べた。昨年度までに、野生型PDIの過剰発現細胞ではGHの産生が減少するが、イソメラーゼ活性中心変異体過剰発現では減少しないことを明らかにし、PDIのイソメラーゼ活性がT_3のTRを介した転写制御に関わることが考えられた。イソメラーゼ活性はタンパク質のシステインの酸化還元状態の変換に関わる。一方、いくつかの転写因子において、そのシステイン残基の酸化還元状態による転写活性の変化が知られている。そこで、TRも酸化還元状態の変化によって、転写活性が変化しているのではないかと考えた。また、転写因子の酸化還元状態を制御する因子としては、Redox factor1(Ref-1)というタンパク質が知られている。そのため、PDIはRef-1の酸化還元状態を制御することで、Ref-1を介して転写因子の酸化還元状態を変化させているのではないかと考えて解析を進めた。その結果、TRはRef-1と相互作用しており、さらにRef-1の過剰発現細胞では、TRによる転写活性が促進されることを見出した。このことから、Ref-1はTRの転写活性を制御していることが示唆された。また、Ref-1とPDIとの相互作用も検出され、さらにPDI過剰発現細胞においてRef-1の酸化還元状態が変化していた。以上の結果から、PDIはRef-1の酸化還元状態を制御することで、TRの酸化還元状態の変化を引き起こしていることが示唆された。これらの結果に関して、Journal of Biological Chemistryに投稿中である。

PDI的生理功能分析今年，我们在PDI的生理功能分析方面取得了很大进展。当PDI在垂体肿瘤来源的细胞（GH3）中过度表达时，其中生长激素（GH）以T3依赖性方式通过甲状腺激素受体（TR）诱导，T_3反应（GH转录诱导）被抑制。已表明它被抑制了。因此，我们研究了其中的机制。去年，我们证明了过度表达野生型 PDI 的细胞中 GH 产量减少，但在过度表达异构酶活性中心突变体的细胞中却没有减少，并且我认为 PDI 的异构酶活性通过 T_3 TR 参与转录调节。异构酶活性参与蛋白质中半胱氨酸氧化还原状态的转换。另一方面，已知一些转录因子的转录活性根据其半胱氨酸残基的氧化还原状态而变化。因此，我们推测TR的转录活性也可能因氧化还原状态的变化而改变。此外，称为氧化还原因子1（Ref-1）的蛋白质被认为是控制转录因子氧化还原状态的因子。因此，我们推测PDI可能通过控制Ref-1的氧化还原状态，通过Ref-1改变转录因子的氧化还原状态，并进行分析。结果，他们发现TR与Ref-1相互作用，并且TR的转录活性在过度表达Ref-1的细胞中得到促进。这表明Ref-1控制TR的转录活性。还检测到Ref-1和PDI之间的相互作用，并且在过表达PDI的细胞中Ref-1的氧化还原状态发生改变。上述结果表明PDI通过控制Ref-1的氧化还原态引起TR氧化还原态的变化。这些结果正在提交给《生物化学杂志》。