神経系に病原性をもつトリレトロウイルスの発癌機序解明

阐明对神经系统致病的禽逆转录病毒的致癌机制

基本信息

批准号：
09J08297
负责人：
越智章仁
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

本課題の目的は神経病原性トリ白血病ウイルス(ALV-A)の発癌機序を明らかにする事である。そこで,神経病原性ALVのゲノム多様性と出現経緯を検索した。今年度得られた成績は以下の通りである。1.ドイツで系統維持されている鶏8内種,計42羽をFGV特異的nested PCRで検索したところ37羽が陽性を示した。しかし,これらnested PCR陽性鶏からウイルスは分離されなかった。2.熊本地方で系統維持されている日本鶏にトリの神経膠腫瘍関連病変が認められた。これら神経病変罹患鶏あるいはnested PCR陽性鶏から分離された9株の乱V-Aのゲノム解析を行った。9株中5株(Km_063,Km_077,Km_5621,Km_5624,Km_5625)はFGV特異配列を持つFGV変異株であったが,その他の4株(Km_5666,Km_5843,Km_5845,Km_5846)はFGV特異配列を欠いていた。3.国内の実験施設で系統維持されている実験用鶏のFGV感染率を検索した。検索した鶏17系統計49羽中24羽がnested PCRに陽性を示したがウイルスは分離されなかった。4.FGV特異的nested PCRに陽性かつFGVが分離されなかった国内外の鶏のゲノムを検索した。また,FGV特異配列を欠くALV3株(Km_5843,Km_5845,Km_5846)が分離された鶏のゲノムも検索した。これらの鶏のゲノムから増幅されたnested PCR産物はFGV特異配列と91.2～98.5%の相同性を示した。NCBI chicken genome BLASTを用いて相同性検索を行ったところ,鶏ゲノムにはFGV特異配列に類似する配列は存在しなかった。ことから,FGV特異配列は内在性トリレトロウイルスの一部であると推察された。さらに,FGV特異配列近傍の塩基配列を明らかにするため,genome walking法で検索した。その結果,ALV ゲノム env SU末端～LTR R領域に相同する約1.2kbが増幅され,FGVの対応領域と98.9%の相同性を示した。以上の成績からFGVは国内の日本鶏の中で出現し,この出現にはFGV特異配列を持つ内在性トリレトロウイルスが関与していると推察された。

该项目的目的是阐明神经病性禽白血病病毒（ALV-A）的致癌机制。因此，我们寻找神经致病性ALV的基因组多样性和出现历史。今年获得的结果如下。 1.采用FGV特异性巢式PCR对德国饲养的8个鸡品种共42只鸡进行检测，结果呈阳性37只。然而，没有从这些巢式 PCR 阳性鸡中分离出病毒。 2.在熊本地区饲养的日本鸡中观察到与禽神经胶质瘤相关的病变。我们对从患有神经损伤的鸡或巢式 PCR 阳性鸡中分离出的 9 种 V-A 菌株进行了基因组分析。 9株菌株中的5株（Km_063、Km_077、Km_5621、Km_5624、Km_5625）是具有FGV特异性序列的FGV突变株，而其他4株（Km_5666、Km_5843、Km_5845、Km_5846）缺乏FGV特异性序列。 3. 调查国内实验设施饲养的实验鸡的FGV感染率。 17 个品系的 49 只鸡中，有 24 只鸡的巢式 PCR 检测结果呈阳性，但没有分离出病毒。 4. 检索了FGV特异性巢式PCR阳性且未分离到FGV的国内外鸡的基因组。我们还搜索了鸡基因组，从中分离出缺乏 FGV 特异性序列的 ALV3 菌株（Km_5843、Km_5845、Km_5846）。从这些鸡基因组扩增的巢式 PCR 产物与 FGV 特异性序列具有 91.2-98.5% 的同源性。使用 NCBI 鸡基因组 BLAST 进行的同源性搜索显示，鸡基因组中不存在与 FGV 特异性序列相似的序列。因此，推测FGV特异性序列是内源性禽逆转录病毒的一部分。此外，为了明确FGV特异序列附近的碱基序列，我们使用基因组行走法进行了搜索。结果，扩增了与ALV基因组LTR R区域的env SU末端同源的约1.2kb，与FGV的相应区域显示出98.9%的同源性。从上述结果推测，FGV出现在日本的日本鸡中，并且具有FGV特异性序列的内源性禽逆转录病毒与该出现有关。