神経系に病原性をもつトリレトロウイルスの発癌機序解明

阐明对神经系统致病的禽逆转录病毒的致癌机制

基本信息

批准号：
09J08297
负责人：
越智章仁
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

本課題の目的は神経病原性トリ白血病ウイルス(ALV-A)の発癌機序を明らかにする事である。そこで,神経病原性ALVのゲノム多様性と出現経緯を検索した。今年度得られた成績は以下の通りである。1.ドイツで系統維持されている鶏8内種,計42羽をFGV特異的nested PCRで検索したところ37羽が陽性を示した。しかし,これらnested PCR陽性鶏からウイルスは分離されなかった。2.熊本地方で系統維持されている日本鶏にトリの神経膠腫瘍関連病変が認められた。これら神経病変罹患鶏あるいはnested PCR陽性鶏から分離された9株の乱V-Aのゲノム解析を行った。9株中5株(Km_063,Km_077,Km_5621,Km_5624,Km_5625)はFGV特異配列を持つFGV変異株であったが,その他の4株(Km_5666,Km_5843,Km_5845,Km_5846)はFGV特異配列を欠いていた。3.国内の実験施設で系統維持されている実験用鶏のFGV感染率を検索した。検索した鶏17系統計49羽中24羽がnested PCRに陽性を示したがウイルスは分離されなかった。4.FGV特異的nested PCRに陽性かつFGVが分離されなかった国内外の鶏のゲノムを検索した。また,FGV特異配列を欠くALV3株(Km_5843,Km_5845,Km_5846)が分離された鶏のゲノムも検索した。これらの鶏のゲノムから増幅されたnested PCR産物はFGV特異配列と91.2～98.5%の相同性を示した。NCBI chicken genome BLASTを用いて相同性検索を行ったところ,鶏ゲノムにはFGV特異配列に類似する配列は存在しなかった。ことから,FGV特異配列は内在性トリレトロウイルスの一部であると推察された。さらに,FGV特異配列近傍の塩基配列を明らかにするため,genome walking法で検索した。その結果,ALV ゲノム env SU末端～LTR R領域に相同する約1.2kbが増幅され,FGVの対応領域と98.9%の相同性を示した。以上の成績からFGVは国内の日本鶏の中で出現し,この出現にはFGV特異配列を持つ内在性トリレトロウイルスが関与していると推察された。

该主题的目的是阐明神经病性禽白血病病毒（ALV-A）的致癌机制。因此，我们搜索了基因组多样性和神经致病性ALV的历史。今年获得的结果如下：1。使用FGV特异性的嵌套PCR搜查了总共42只鸡，包括在德国维持的八种鸡，而37种为正。但是，该病毒并未从这些嵌套的PCR阳性鸡中分离出来。 2。在库曼托地区维持的日本鸡中发现了鸟类鸟类的神经胶质蛋白相关病变。从这些神经系统影响的鸡或嵌套的PCR阳性鸡中分离出的9种破坏V-A菌株的基因组分析。九种菌株中的五个（KM_063，KM_077，KM_5621，KM_5624，KM_5625）是具有FGV特定序列的FGV突变体，而其他四个菌株（KM_5666，KM_5666，KM_5843，KM_5843，KM_5845，KM_5845，KM__5846）缺少FGV。 3。我们在国内实验设施中维持的实验鸡中搜索了FGV感染率。在49 17只鸡统计统计中，有24只鸟类对嵌套PCR呈阳性，但并未分离该病毒。 4。我们搜索了来自日本和国外的鸡基因组，这些基因组对FGV特异性的嵌套PCR呈阳性，而FGV并未隔离。我们还搜索了鸡基因组，该基因组缺乏FGV特异性序列（KM_5843，KM_5845，KM_5846）。从这些鸡基因组中扩增的嵌套PCR产物显示出具有FGV特定序列的91.2-98.5％同源性。使用NCBI鸡基因组BLAST进行同源搜索，发现没有类似于鸡基因组中FGV特异性序列的序列。因此，据估计，FGV特异性序列是内源性禽逆转录病毒的一部分。此外，为了阐明FGV特异性序列附近的核苷酸序列，我们使用基因组步行方法进行了搜索。结果表明，大约1.2 kb（与ALV基因组的Su末端同源）进行了扩增，显示出与FGV相应区域的98.9％同源性。基于上述结果，FGV出现在日本的日本鸡中，据估计，具有FGV特异性序列的内源性禽逆转录病毒参与了这种情况。