イヌの肥満細胞腫の分子病態解析とその臨床応用

犬肥大细胞瘤的分子病理分析及其临床应用

基本信息

批准号：
09J01283
负责人：
竹内由則
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J01283/
关键词：
イヌ肥満細胞腫分子病態分子標的治療

项目摘要

昨年度までの研究により、四種類のイヌの肥満細胞腫(Mast cell tumor, MCT)細胞株はKIT変異、c-Kitのリン酸化およびSCF発現について複数のパターンを有していることが明らかにされた。この結果を受け、昨年度の研究実施計画3に該当する研究として、これまでにKIT配列およびc-Kitリン酸化が同定された細胞株に対する4種のチロシンキナーゼ阻害剤(TKI)による増殖阻害効果を検討するとともに、この阻害効果に対するABCB1の影響を解析した。ABCB1はABCトランスポーターファミリーの一種であり、抗癌剤を含む多数の薬剤を排泄することから、その過剰発現がさまざまな腫傷の薬剤耐性に関与することが知られている。細胞株としてHRMC、VIMC1、CMMC1を使用し、TKIとしてAxitinib、Imatinib、Masitinib、Vatalanibの4剤を用いた。これら4剤のHRMC細胞に対するIC_<50>値は、VIMC1、CMMC1と比べると明らかに高く、その増殖阻害には高い薬物濃度が必要であった。HRMCおよびCMMC1においては、c-Kitリン酸化を抑制する濃度で細胞増殖も抑制された。これに対し、VIMC1のc-Kitリン酸化を抑制するには、その増殖を抑制するよりもはるかに高い濃度が必要であった。機能的なABCB1はVIMC1にのみ発現しており、その基質であるシクロスポリンを添加することで、VIMC1に対するTKIの効果がやや増強された。以上の結果より、KIT遺伝子変異のない細胞株(HRMC)はKIT遺伝子変異を有する細胞に比べてTKIに対する感受性が低いことが明らかにされた。また、VIMC1においては、TKIはc-Kit以外の標的に作用することによって増殖を抑制している可能性が高く、本研究において使用したTKIはABCB1の基質となりうることが示された。当成果については、San Diegoにて行われたVeterinary cancer society 2010 annual conferenceにて発表した。さらに、国際学術誌であるJournal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics誌に投稿し、受理された。

直到去年的研究表明，四种类型的狗（肥大细胞肿瘤，MCT）具有多种试剂盒变异，C-KIT磷酸化和SCF表达。根据这一结果，与去年的研究实施计划3相对应的研究具有四个酪蛋白酶抑制剂（TKI）的增殖作用，用于迄今已确定其试剂序列和C-KIT磷酸盐的细胞（TKI）（TKI）。正如我们所考虑的，我们分析了ABCB1对这种抑制作用的影响。 ABCB1是一种ABC转运蛋白家族，已知会排泄大量药物，包括抗癌药物，因此过度表达涉及各种耐药性，以使各种肿胀。 HRMC，VIMC1和CMMC1用作细胞库存，将四种药物用作TKI，Axitinib，imatinib，Masitinib和Vatalanib。这四种药物的IC_ <50>值明显高于VIMC1和CMMC1，并且需要高药物浓度才能抑制生长。在HRMC和CMMC1中，抑制C-KIT磷酸化的浓度也抑制了细胞增殖。另一方面，为了抑制VIMC1的C-Kit磷酸化，比抑制其增殖所需的浓度要高得多。功能性ABCB1仅在VIMC1中表达，并且通过添加其底物环孢素，TKI对VIMC1的影响略有增加。从上述结果中，它表明，没有试剂盒基因突变（HRMC）的细胞库存对TKI的敏感性不如具有KIT基因突变的细胞敏感。在VIMC1中，TKI很可能通过作用于非C-KIT靶标抑制了增殖，并且本研究中使用的TKI可能是ABCB1的底物。结果是在圣地亚哥举行的兽医癌症协会2010年会议上宣布的。此外，它还发布到国际学术杂志兽医药理学和治疗学杂志上。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Aberrant autophosphorylation of c-Kit receptor in canine mast cell tumor cell lines.

犬肥大细胞肿瘤细胞系中 c-Kit 受体的异常自磷酸化。

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
Veterinary Immunology and Immunopathology
影响因子：
1.8
作者：
Y.Takeuchi;Y.Fujino;M.Watanabe;T.Nakagawa;K.Ohno;N.Sasaki;S.Sugano;H.Tsujimoto.
通讯作者：
H.Tsujimoto.

犬の肥満細胞腫細胞株における c-Kit 遺伝子全塩基配列解析およびKIT蛋白リン酸化の解析

犬肥大细胞瘤细胞系中完整的c-Kit基因序列分析和KIT蛋白磷酸化分析

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
JVM獣医畜産新報 62(7)
影响因子：
0
作者：
竹内由則;藤野泰人;大野耕一;渡邊学;菅野純夫;佐々木伸雄;辻本元
通讯作者：
辻本元

Biological effect of tyrosine kinase inhibitors on three canine mast cell tumor cell lines with various KIT statuses.

酪氨酸激酶抑制剂对具有不同 KIT 状态的三种犬肥大细胞肿瘤细胞系的生物学效应。

DOI：
发表时间：
2011
期刊：
Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics
影响因子：
1.3
作者：
Y.Takeuchi;Y.Fujino;K.Fukushima;M.Watanabe;T.Nakagawa;K.Ohno;N.Sasaki;S.Sugano;H.Tsujimoto.
通讯作者：
H.Tsujimoto.

Biological effect of tyrosine kinase inhibitors on three canine mast cell tumor cell lines with and without c-kit mutation.

酪氨酸激酶抑制剂对具有和不具有 c-kit 突变的三种犬肥大细胞肿瘤细胞系的生物学效应。