スフィンゴシン1リン酸のシグナル伝達を用いたアルツハイマー病の病態解析

使用 1-磷酸鞘氨醇信号传导对阿尔茨海默病进行病理学分析

基本信息

批准号：
09F09733
负责人：
中村俊一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

スフィンゴシン1燐酸(SIP)は酵母からヒトに至る真核生物に広く存在し、血管内皮細胞や繊維芽細胞等の増殖促進作用やアポトーシス抑制能など多彩な機能を有する脂質メディエーターである。中枢神経系ではSIPやその産生酵素スフィンゴシン・キナーゼ(SK)が豊富に存在するが、神経に特異的な機能に関しては不明であった。最近我々は微量のSIPが海馬神経細胞から神経伝達物質の放出を引き起こすことを報告した。これらの事実は、SIPが生理的に記憶や学習の過程で重要な役割を演じている可能性を示唆している。そこで我々はこれらの認知症関連蛋白質とSIPシグナル伝達系の接点を探ることにより、認知症の病態解析を分子レベルで行いたいと考えている。これまでに我々は、これらの認知症関連蛋白質の遺伝子の分子クローニングに成功している。今後これらのタンパク質をSH-SY5Y細胞に恒常的に発現する細胞株を樹立し、SIPシグナル伝達系を介する神経伝達物質の放出に及ぼす影響について解析を行ってきた。αシヌクレインを発現する細胞にSIP産生酵素である.スフィンゴシンキナーゼ(SK)の阻害薬DMSを作用させたところ、αシヌクレインの細胞外への放出が促進された♂しかしながら、別のSK阻害薬HACPTを細胞に作用させたところ、αシヌクレインの細胞外への放出はかえって抑制された。これらの相反する結果の解釈として、用いたSK阻害薬のSKに対する特異性を調べる必要性があった。特にDMSは高濃度で細胞に用いると、プロテインキナーゼCを抑制するとの報告も有り、注意が必要である。更に、SKには2つのアイソザイムSK1とSK2があり、DMSはSK1を特異的に抑制することをin vitroの系を用いて明らかにした。今後SK2とαシヌグレインの細胞外への放出との関連に焦点を合わせて更に解析を進めてゆきたい。

鞘球蛋白1磷酸（SIP）是一种具有多种功能的脂质介体，例如各种功能，例如多种功能，例如血管内皮细胞和纤维芽的血管扩张效应以及抑制能力以及抑制能力凋亡，正如从酵母到人类的锚定生物中广泛发现的那样。在中枢神经系统中，有大量的sips及其产生酶链丁糖苷激酶（SK），但对神经特异性功能尚不清楚。最近，我们报道了少量的SIP导致从海马神经细胞中释放神经递质。这些事实表明，SIP可能在记忆和学习过程中起重要作用。因此，我们希望通过探索这些相关痴呆相关蛋白与SIP信号传递系统之间的接触来对分子水平进行痴呆的病理分析。到目前为止，我们已经成功地完成了这些相关痴呆相关蛋白的分子清洁。将来，我们建立了在SH-SY5Y细胞中不断表达这些蛋白质的细胞库存，并通过SIP信号传输系统分析了神经递质释放的影响。 SIP产生酶是SPHingo sinkinase（SK）的抑制剂DMS，可促进α-脑核酸外部细胞的释放。。作为对这些相互矛盾的结果的解释，有必要检查用于SK的SK抑制剂的特异性。特别是，有一份报告称，DMS用于高浓度的细胞，必须小心，因此必须注意，因为据报道，抑制了保护性激酶C。此外，SK具有两个Zyme SK1和SK2，并且使用专门抑制SK1的体外系统揭示了DMS。将来，我想进一步分析SK2和α -Shinugrein在细胞外部的释放。