イノシトール燐脂質の代謝の調節とプロテイン・キナーゼCの活性化機構

肌醇磷脂代谢调控及蛋白激酶C激活机制

基本信息

批准号：
04670162
负责人：
中村俊一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

従来より、増殖因子等による細胞活性化時における細胞膜の燐脂質代謝回転促進が、細胞内情報伝達機構と密接な関連があるものと考えられ、研究されてきた。特に、イノシトール燐脂質の代謝回転の結果産生されるジアシルグリセロール(DG)とIP_3は、セカンドメッセンジャーと考えられ、これらを介した一連の反応により、分泌・凝集等を始めとする多くの生理現象が説明されてきた。一方最近では、コリン燐脂質代謝回転の促進が、ホスホリパーゼD(PLD)の活性化と共に、増殖・分化を始めとした細胞の長期効果の際に重要な役割を担っていることを示唆するデータも出始めている。そこで我々は、PLD活性化の結果引き起こされる細胞内での早期反応を調べる目的で、ヒト白血病細胞株、HL-60細胞を用いてPLD活性化時に見られる細胞膜の燐脂質代謝の初期変化を観察した。リゾ血小板活性化因子(リゾPAF)で標識したHL-60細胞を、プロテイン・キナーゼC(PKC)の活性化剤として知られる、ホルボール・エステル(TPA)、或いは外因性DG(DiC_8)を用いてPLDを活性化したところ、容量依存性、且つ時間依存性に放射性イノシトール燐脂質とエタノールアミン燐脂質の増加が認められた。また同一条件で、放射性DGの産生も観察されており、コリン燐脂質を経由した新たな経路によるDG産生機序も考えられる。また以上の現象は、H-7、或いはスタウロスポリンを用いた一連の阻害実験から、PKCを介した反応であると推測される。これらの現象がPKCを介したPLDの活性化による反応か、或いは直接PKCを介した燐脂質代謝の調節であるかは現在のところ不明である。今後さらに外因性PLDの影響を調べることにより、PLD活性化により引き起こされる現象を観察し、細胞の長期効果との関連を明らかにしてゆく予定である。

自过去以来，通过增殖因子在细胞激活过程中促进细胞膜的磷脂代谢旋转已被认为与细胞内信息传递机制密切相关，并且已经进行了研究。特别是，由于innochot脂质的旋转而产生的二二酰甘油（DG）和IP_3被认为是第二个使者，并且由于这些通过这些反应，许多生理现象，例如分泌和分泌和分泌现象聚集，包括分泌和聚集。另一方面，表明促进chorin磷脂代谢旋转的数据在包括传播和分化在内的长期效应以及磷脂酶D（PLD）的激活中是重要的作用。。因此，我们观察到使用人白血病细胞和HL-60细胞在PLD激活过程中使用的细胞膜的初始变化，以检查由PLD激活引起的早期反应。使用由Lizophores激活因子（Resiza PAF）签署的HL-60细胞作为蛋白激酶C（PKC）的活化剂，使用HOL Ball酯（TPA）或外部因果DG（DIC_8）。在放射性的伊磷酸磷脂和乙醇胺磷脂中脂质的脂质依赖性依赖性和时间依赖性。在相同的条件下，还观察到放射性DG的产生，并考虑了通过霍林磷脂质的新途径通过新途径的DG生产机制。假定上述现象是使用H-7或星孢子的一系列抑制剂中的PKC反应。目前尚不清楚这些现象反应是通过PKC激活PLD还是直接通过PKC调整磷脂代谢。将来，通过检查外部因素PLD的影响，将观察到由PLD激活引起的现象，并将揭示与细胞的长期效应的关系。