CD4陽性ヘルパーT細胞に認識される上皮性癌抗原遺伝子の同定

CD4阳性辅助T细胞识别的上皮癌抗原基因的鉴定

基本信息

批准号：
13218131
负责人：
原田守
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218131/
关键词：
がん免疫免疫療法癌抗原 CD4陽性T細胞ペプチド

项目摘要

本研究では、CD4陽性ヘルパーT細胞に認識されるヒト癌細胞の癌抗原をコードする遺伝子を新たに単離することを、また、既知の癌抗原に関しては、クラスII分子に提示されCD4陽性T細胞に認識される新たな抗原ペプチドを同定することを試みた。その結果、卵巣癌患者の癌性腹水よりクラスII分子を恒常的に発現しているアロ腫瘍であるB細胞系・単球系白血病細胞を自己HLA-DRB1^*04051拘束性に認識するCD4陽性T細胞(SA-1)を確立した。このCD4陽性細胞は自己末梢リンパ球にも反応し自己反応性を有することが判明した。cDNAライブラリー発現クローニングを行なうために、HLA-DRA1^*0101,-DRB1^*04051を恒常的に発現した293T細胞(293T-DR0405)を確立し、また、細胞内にクラスII抗原プロセッシングに必要な分子(IiやHLA-DM)を発現させるためにCIITA cDNA準備しtransfectしたが、SA-1細胞はCIITAをtransfectしない293T-DR0405細胞にも反応した。また、クラスII分子を発現した上皮性癌細胞株を反応性確認のスクリーニングに用いることを目的に、CIITAを恒常的に発現した(内因性クラスII分子を発現することを意味する)上皮性癌の細胞株を作製した。また、クラスI癌抗原ペプチドUBE2V 43-51をワクチン投与され、このペプチドに対するIgG抗体が増強した患者の末梢リンパ球からHLA-DRB1^*0403拘束性にUBE2V 43-51ペプチドを認識するCD4陽性T細胞株を樹立した。この結果は、クラスIペプチドワクチン療法でのCTL誘導を伴わない抗腫瘍効果や、CD4陽性ヘルパーT細胞誘導を目的としたペプチドワクチン療法のプロトコールに示唆を与えるものと考えられる。

在这项研究中，我们的目标是新分离出编码人类癌细胞癌症抗原的基因，该基因可被 CD4 阳性辅助 T 细胞识别。我们试图鉴定细胞识别的新抗原肽。因此，在卵巢癌患者的癌性腹水中，识别 B 细胞/单核细胞白血病细胞（持续表达 II 类分子的同种肿瘤）的 CD4 阳性细胞是自身 HLA-DRB1^*04051 限制性 T。细胞(SA-1)被建立。这些 CD4 阳性细胞还与自体外周淋巴细胞发生反应，并被发现具有自身反应性。为了进行cDNA文库表达克隆，我们建立了组成型表达HLA-DRA1^*0101、-DRB1^*04051的293T细胞（293T-DR0405），并且还发现II类需要293T细胞（293T-DR0405） CIITA 抗原加工来表达分子（Ii 和 HLA-DM）尽管制备并转染了cDNA，SA-1细胞也与未转染CIITA的293T-DR0405细胞发生反应。此外，为了筛选表达II类分子的上皮癌细胞系以确认反应性，我们研究了组成型表达CIITA（意味着它们表达内源性II类分子）的上皮癌细胞系A细胞系。此外，在接种 I 类癌抗原肽 UBE2V 43-51 疫苗并发育为 I 类癌症抗原肽 UBE2V 43-51 的患者外周淋巴细胞中发现了以 HLA-DRB1^*0403 限制性方式识别 UBE2V 43-51 肽的 CD4 阳性 T 细胞。建立了针对该肽的 IgG 抗体。这些结果被认为可以为无需CTL诱导的I类肽疫苗治疗的抗肿瘤效果以及旨在诱导CD4阳性辅助T细胞的肽疫苗治疗方案提供建议。