小脳顆粒細胞における低カリウムで誘導されるアポトーシスの細胞内分子機構

低钾诱导小脑颗粒细胞凋亡的细胞内分子机制

基本信息

批准号：
01J01008
负责人：
山岸覚
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J01008/
关键词：
小脳顆粒細胞 ASK1 p38 MAPK c-Jun BDNF IGF-1 アポトーシス低カリウム

项目摘要

私は、昨年度までに小脳顆粒細を用いて、低カリウムで誘導されるアポトーシスにおいてp38 MAPKがc-Junの活性化およびアポトーシス誘導に深く関与していることを報告した(J. Biol. Chem.2001,276,5129-5133)。今年度は新たに以下のことを明らかにした。(1)ASK1によるp38 MAPK-c-Jun経路の調節ASK1はストレス応答に重要なJNKやp38 MAPKを活性化させることがよく知られているキナーゼである。そこで私は、培養小脳顆粒細胞においてASK1がp38 MAPKの活性化に関与しているかを検討した。その結果、LK培地置換後3時間において、ASK1が活性化されることを見出した。優性抑制変異型ASK1(ASK-KM)を発現させると、p38 MAPKおよびc-Junのリン酸化が抑制され、細胞死が抑制されることを見出した。また、恒常的活性化型ASK1を発現させると、p38 MAPKおよびc-Junのリン酸化の増強が観察された(J. Biochemistry, in press)。(2)PI3-KによるASK1経路の活性化抑制生存維持に関わっていることが知られているPI3-KとASK1-p38 MAPK-c-Jun経路の関係について、PI3-Kの阻害剤であるLY294002を用いて解析を行った。その結果、LY294002を投与することにより、ASK1の活性および、p38 MAPKとc-Junのリン酸化が顕著に亢進することがわかった。この結果は、PI3-KがASK1-p38 MAPK-c-Jun経路を負に制御していることを示している。また、BDNFとIGF-1はPI3-K経路の活性化を介し、ASK1にはじまるp38 MAPK-c-Jun経路を抑制することにより生存維持効果を発揮していることも見出した(論文投稿中)。

去年，我利用小脑颗粒细胞报道了p38 MAPK在低钾诱导的细胞凋亡中深度参与c-Jun激活和细胞凋亡诱导（J. Biol. Chem. 2001,276,5129-5133）。今年，我们新宣布了以下内容： (1) ASK1 对 p38 MAPK-c-Jun 通路的调节 ASK1 是众所周知的激活 JNK 和 p38 MAPK 的激酶，这对应激反应很重要。因此，我研究了ASK1是否参与了培养的小脑颗粒细胞中p38 MAPK的激活。结果，我们发现ASK1在更换LK培养基后3小时被激活。我们发现显性抑制突变体 ASK1 (ASK-KM) 的表达抑制 p38 MAPK 和 c-Jun 的磷酸化，并抑制细胞死亡。此外，当表达组成型激活的 ASK1 时，观察到 p38 MAPK 和 c-Jun 的磷酸化增强（J. Biochemistry，出版中）。 (2)PI3-K对ASK1途径激活的抑制对于已知参与生存维持的PI3-K和ASK1-p38 MAPK-c-Jun途径之间的关系，使用LY294002进行PI3-K抑制剂分析。结果显示，服用 LY294002 显着增强 ASK1 活性以及 p38 MAPK 和 c-Jun 的磷酸化。该结果表明 PI3-K 负向调节 ASK1-p38 MAPK-c-Jun 通路。我们还发现，BDNF 和 IGF-1 通过激活 PI3-K 通路来抑制以 ASK1 为起始的 p38 MAPK-c-Jun 通路，从而发挥生存作用（论文正在提交）。