慢性疼痛並びにモルヒネ耐性における可塑的神経回路変調と可視化

慢性疼痛和吗啡耐受的可塑性神经回路调制和可视化

基本信息

批准号：
01J00273
负责人：
井上誠
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

一つは、神経因性疼痛における可塑的機能変調の分子機構の解明とその可塑的変調の可視化を試みてきた。神経因性疼痛モデル動物における神経因性疼痛の責任線維を分子レベルでの解析から同定した。この線維の特異的発現受容体のプロモーターによって制御される蛍光蛋白質遺伝子を脊髄後根神経節に特異的に発現させることに成功した。この手法により、責任線維の可塑的シナプス形成を可視化することを試みており、結果がで次第、論文作成に取りかかる予定である。また、責任線維の脊髄後根神経細胞のみをターゲットにした神経傷害時の可塑的遺伝子変調の解析も試みている。一方で、神経因性疼痛における可塑的機能変調の分子機構は神経傷害後に誘導されるリゾフォスファチジン酸が一次知覚神経の脱随、後根神経節や脊髄後角における痛み関連性遺伝子・蛋白質の発現調節を行うためであることを突き止め、論文投稿中である。もう一つは、モルヒネ鎮痛耐性形成の分子基盤の解明とその際の可塑的変調の可視化を試みてきた。モルヒネ鎮痛耐性の分子機構としてはモルヒネ適用時にアンチオピオイド機能の亢進が起因することを、遺伝子欠損動物を用いた解析から明らかにしてきていたが、さらに、この遺伝子欠損動物にその遺伝子を脳部位特異的にレスキューさせ、部位特異的な機能回復を確認するという新たな手法により、耐性形成に関わるアンチオピオイドシステムの役割を明らかにした。一方、慢性適用時に認められる可塑的神経回路変調の可視化においては、モルヒネ受容体のプロモーターで制御した小麦胚芽レクチン(WGA)と蛍光蛋白質の融合蛋白質遺伝子を脳の耐性形成や依存性形成に関わる領域に発現させ、シナプスを介する神経ネットワークを可視化することに成功した。また、モルヒネ慢性適用に伴うこの神経ネットワークの可塑的変調を可視化することにも成功し、現在論文作成中である。

首先，我们试图阐明神经性疼痛中可塑性功能调节的分子机制，并将这种可塑性调节可视化。通过分子水平分析鉴定了动物神经病理性疼痛模型中负责神经病理性疼痛的纤维。我们成功表达了荧光蛋白基因，该基因由这种纤维特异性表达受体的启动子控制，特别是在背根神经节中。使用这种方法，我们试图可视化负责纤维中塑料突触的形成，我们计划在结果出来后立即开始撰写论文。我们还试图通过仅针对负责的脊髓背根神经元来分析神经损伤期间的可塑性基因调节。另一方面，神经病理性疼痛的可塑性功能调节的分子机制是神经损伤后诱导的溶血磷脂酸导致脊髓背根神经节和背角中的初级感觉神经和疼痛相关基因和蛋白质的脱离。已确定这是为了规范的表达，目前正在提交论文。其次，我们试图阐明吗啡镇痛耐受发展的分子基础，并可视化所涉及的可塑性调节。使用基因缺陷动物进行的分析揭示了吗啡镇痛耐受的分子机制是由于应用吗啡时抗阿片类药物功能增强，通过一种新方法来抢救患者并确认特定部位的功能恢复，我们阐明了吗啡的作用。抗阿片系统参与耐受形成。另一方面，为了可视化长期应用过程中观察到的可塑性神经回路调节，我们使用麦芽凝集素（WGA）和吗啡受体启动子控制的荧光蛋白的融合蛋白基因来靶向涉及大脑耐受和依赖性的区域我们成功地表达了这种蛋白质并可视化了突触介导的神经网络。由于长期使用吗啡，我们还成功地可视化了该神经网络的可塑性调节，目前正在准备一篇论文。