敗血症病態における骨髄由来上皮分子化細胞を用いた組織再生理論の確立

脓毒症病理中骨髓源性上皮细胞组织再生理论的建立

基本信息

批准号：
20659282
负责人：
松田直之
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

リポポリサッカライド(LPS)の静脈内投与を施した8～12週齢の雄性BALB-Cマウスにおいて,敗血症類似病態の時系列に沿って,サイトケラチン陽性多能性上皮分化細胞(epidermal progenitor cell)が肺に動員されることを組織科学的方法で確認した。これらは,podoplanin(1型肺胞上皮細胞マーカー)ではなく,SP-C(2型肺胞上皮細胞マーカー)やcaveolin-1(血管内皮細胞)と共存する傾向があり,Gr-1あるいはvon Willebrand因子と共発現していることが免疫組織科学的手法で明らかとなった。また,抗サイトケラチン抗体IgGビーズや抗caveolin-1抗体IgGビーズを用いて,epidermal progenitor cellを分離した結果,共にGr-1を強く発現することが確認された。一方,骨髄抑制を特徴とするop/opマウスにLPSを静脈内投与し敗血症類似病態とすると,epidermal progenitor cellの肺への動員が消失した。さらに野生型BALB-Cマウスとop/opマウスにおいて,LPS10mg/kgおよび20mg/kgの腹腔内投与による生存曲線を比較すると,op/opマウスで死亡率が高いことが確認された。Epidermal progenitor cellが骨髄由来であることをさらに評価するために,GFP-BMTマウスを用いて,LPS10mg/kgおよび20mg/kgをGFP-BMTマウスの腹腔内に投与し,GFPとサイトケラチンの共陽性細胞が肺に出現するかを確認した結果,LPS投与の約1～3時間よりこれらの細胞が肺に集積しすることが確認された。本研究は敗血症病態におけるepidermal progenitor cellの肺への動員を評価したものである。従来,幼弱球として分類されてきた敗血症病態の白血球は,骨髄より動員され,肺胞2型上皮細胞や血管内皮細胞に分化できる可能性を持つことが確認された。

在静脉内给予脂多糖（LPS）治疗的8至12周龄雄性BALB-C小鼠中，沿着败血症样病理的时间线检测到细胞角蛋白阳性的表皮祖细胞，通过组织学方法证实了这一点。动员到肺部。这些往往与 SP-C（2 型肺泡上皮细胞标记物）和 Caveolin-1（血管内皮细胞）共存，而不是与 podoplanin（1 型肺泡上皮细胞标记物）共存，Gr-1 或 von Willebrand 免疫组织化学方法显示，它是与因子共表达。此外，当使用抗细胞角蛋白抗体IgG珠和抗caveolin-1抗体IgG珠分离表皮祖细胞时，证实两种细胞都强烈表达Gr-1。另一方面，当给以骨髓抑制为特征的op/op小鼠静脉注射LPS以诱导脓毒症样病症时，肺部表皮祖细胞的募集消失了。此外，当比较野生型BALB-C小鼠和op/op小鼠腹腔注射10mg/kg和20mg/kg LPS后的存活曲线时，证实op/op小鼠的死亡率较高。为了进一步评价表皮祖细胞来源于骨髓，我们对GFP-BMT小鼠腹腔内施用10mg/kg和20mg/kg的LPS，并确认GFP和细胞角蛋白共阳性的细胞是否出现在细胞中。肺部，证实这些细胞在LPS施用后约1至3小时在肺部积聚。这项研究评估了脓毒症期间表皮祖细胞向肺部的募集情况。现已证实，传统上被归类为未成熟细胞的脓毒症白细胞是从骨髓中动员出来的，具有分化为肺泡2型上皮细胞和血管内皮细胞的潜力。