Drug discovery of sepsis by transcriptome analysis

通过转录组分析发现脓毒症药物

基本信息

批准号：
22H03173
负责人：
松田直之
金额：
$ 11.15万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

敗血症は，感染症により臓器障害が進行する病態である。本研究は，課題「トランスクリプトーム解析と創薬基盤形成」として敗血症性多臓器不全の病態解析に着眼し，敗血症により進行する多臓器不全の病態を転写因子の総合的解析として解明することを目的として施行されている。敗血症モデル動物として，雄性Balb-Cマウス（8-12週齢）による臓器障害の確認が開始されている。イソフルラン麻酔下で盲腸結紮・穿孔術（cecum ligation and puncture：CLP）を行い，敗血症モデル動物としてCLP群の作成後24時間および48時間で肺，心臓，肝臓，腎臓，脾臓，骨格筋，大動脈，血液を採取している。転写因子nuclear factor-κB（NF-κB），activator protein-1（AP-1），cAMP-response element binding protein（CREB）のデコイ核酸をCLP作成6時間後に導入し，その転写活性の減弱をゲルシフト法で検討している段階にある。また，敗血症における臓器障害に対して，走査型電子顕微鏡像および透過型電子顕微鏡像として，NF-κB/ AP-1/ CREBのトリプルデコイ核酸の治療効果を確認している過程にある。本研究では，敗血症病態CLPモデルマウスにおいて，転写因子NF-κB，AP-1， CREB，STAT-3，その他，p53，EGR-1，Ets-1などの転写因子の活性を作成したデコイ核酸を用いて減じた際に，それらの転写因子活性に変化が生じるかどうかを検討するものであり，中核となる転写因子の探索を目標としている。独立したネットワーク流を形成する親玉転写因子を同定することにより，それらを同時に抑制できるキメラデコイ核酸（おとり遺伝子）やデコイ核酸カクテルを開発し，その遺伝子治療効果を検証する研究過程にある。

脓毒症是一种因感染而导致器官损伤的病理状态。本研究以脓毒症多器官衰竭的病理分析为主题，以“转录组分析和药物发现平台形成”为主题，旨在通过对转录的综合分析，阐明脓毒症引起的多器官衰竭的病理状况。因素。它是作为一个目的而实施的。雄性 Balb-C 小鼠（8-12 周龄）的器官损伤已开始作为脓毒症模型动物进行确认。在异氟烷麻醉下进行盲肠结扎穿刺（CLP），采集肺、心、肝、肾、脾、骨骼肌、主动脉的血液。 CLP 制备后 6 小时引入转录因子核因子-κB (NF-κB)、激活蛋白-1 (AP-1) 和 cAMP 反应元件结合蛋白 (CREB) 的诱饵核酸，并且它们的转录减弱目前正在考虑该定律。我们还正在利用扫描和透射电子显微镜图像确认 NF-κB/AP-1/CREB 三重诱饵核酸对脓毒症引起的器官损伤的治疗效果。在这项研究中，我们使用诱饵核酸在脓毒症中产生转录因子（如 NF-κB、AP-1、CREB、STAT-3）和其他转录因子（如 p53、EGR-1 和 Ets-1）的活性本研究的目的是检测这些转录因子在使用或减少时活性是否发生变化，目的是发现核心转录因子。通过识别形成独立网络流的主转录因子，我们正在开发嵌合诱饵核酸（诱饵基因）和可同时抑制这些因子的诱饵核酸混合物，目前正在研究验证基因治疗的有效性。