三量体Gタンパク質共役型受容体の脂質修飾による新たな制御機構の解明

通过三聚体 G 蛋白偶联受体的脂质修饰阐明新的调节机制

基本信息

批准号：
20659007
负责人：
木原章雄
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

三量体Gタンパク質共役型受容体(GPCR)の殆どがパルミトイル化(S-アシル化)修飾を受けることが知られているが,その修飾の役割は受容体毎に異なっている。我々はこれまでにスフィンゴシン1-リン酸受容体S1P_1がパルミトイル化を受け,その修飾が効率的なシグナル伝達とインターナリゼーションに重要であることを明らかにしてきた。本年度の研究において我々はその詳細な分子機構の解析を行なった結果,パルミトイル化がインターナリゼーションに重要なセリン残基のリン酸化に必要であることを見出した。さらに本年度は類縁のGPCRであるスフィンゴシン1-リン酸受容体S1P_2とリゾホスファチジン酸受容体LPA_2のパルミトイル化の役割を解析することにより,GPCRにおけるパルミトイル化の役割を規定する因子の解明を目指した。我々はLPA_2のパルミトイル化を受ける2つのシステイン残基を同定し,そのシステインを含むCXXC配列が,LIMドメイン含有タンパク質TRIP6とアポトーシス関連因子Siva-1との結合に関わることを明らかにした。LPA_2を介したシグナルはアポトーシス刺激と拮抗して細胞の生存に関わるが,この相互作用が失われるとその効果が減弱することも見出した。一方,S1P_2もS1P_1やLPA_2と同様に7回目の膜貫通部位直下の細胞質領域に存在するシステイン残基でパルミトイル化を受けることを見出したが,その残基のアラニン変異体を作成してもまだパルミトイル化が残っており,S1P_2はGPCRとしては極めて珍しい例であるが,他の領域でパルミトイル化を受けることが明らかとなった。我々は最近N-メチルアスパラギン酸受容体依存的なセリンラセマーゼの細胞膜へのトランスロケーションにO-アシル化が関与することを見出しているが,S1P_2においてもシステイン残基以外がパルミトイル化されている可能性がある。

众所周知，大多数三量化G蛋白受体（GPCR）的大多数正在修改，但是每个最近的修饰作用都不同。我们已经透露，1-磷酸受体S1P_1的鞘氨酸是层贴片，其修饰对于有效的信号传递和内在化很重要。在今年的研究中，我们发现寄生在丝氨酸残基的氧化是必要的，这对于内在化很重要。在这个财政年度，我们的目的是通过分析S1P_2，Lizophilic Adic受体受体，鞘磷脂1-磷脂酸受体（一种优雅的GPCR）之间的层粘酰化的作用来阐明层粘连化在GPCR中的作用。我们已经确定了两个半胱氨酸残基，其中鉴定了LPA_2 parmit泄漏，并揭示了包含半胱氨酸的CXXC序列与含LiM域的含LiM域蛋白Trip6的结合与凋亡相关因子SIVA-SIVA--- 1。通过LPA_2的信号与预期细胞凋亡刺激的细胞存活有关，但还发现当这种相互作用丢失时效果会降低。另一方面，S1P_2发现它将在膜穿透的第七个专用部分（如S1P_1和LPA_2）下方的半胱氨酸残基中是层贴二，但即使创建了残基，也会产生残基，也是如此。即使存在残留物，棕榈酰化仍然存在，尽管S1P_2是GPCR的一个极为罕见的例子，但已揭示它将在其他地区是棕榈树。我们最近发现，O-验证与N-甲基白杨酸受体依赖性细胞膜的细胞膜上的易位有关，但是在S1P_2中，它可能被棕榈素化为半胱氨酸残基。