転写共役因子CBPとRNA結合タンパクの機能解析

转录辅助因子 CBP 和 RNA 结合蛋白的功能分析

基本信息

批准号：
12028204
负责人：
深水昭吉
金额：
$ 1.34万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12028204/
关键词：
CBP 転写共役因子 RNA結合蛋白 RGGボックス HAT活性 β-カテニン転座統合装置

项目摘要

EWSは,Ewing肉腫でみられる染色体相互転座t(11;22)において22q12に転座する遺伝子として見出された(Nature359,162-165,1992).その後もいくつかの固形腫瘍において,EWSがFli1,ATFやWT1と融合遺伝子を形成していることが報告されている.EWSは656アミノ酸から構成されており,そのC-末端半分側にはRGGボックス,RNA認識モチーフやZincフィンガーモチーフを有しているが,その本来の機能的役割は全く解っていない.CBP(CREB-Binding Protein)は,cystein/histidine-rich(C/H)domainが3カ所(CH1,CH2,CH3),CREB結合領域,bromo-domainやglutamine rich domainが存在し,進化の過程で多様な機能ドメインを獲得した可能性を思わせる特徴的な構造から構成されている.そして,これらのドメインを介して基本転写因子を含めた様々な因子と複合体を形成することが明らかになりつつあり,Histone acetyltransferase(HAT)活性を有する転写インテグレーター(統合装置)としてのCBPによる統合的転写制御機構が注目を集めている.興味深いことに,申請者らはCBPとEWSがin vitroで結合することを見出した(未発表).そこで12年度の公募申請研究では,以下の2点に焦点を絞り,CBPとEWSの相互作用の細胞生物学的意義を明らかにすることを目的とした.≪1≫結合領域の同定:EWSのCBPへの結合領域を詳細に明らかにした.≪2≫細胞生物学的意義:昨年度の研究によって,申請者らはβ-cateninがCBPのCH3領域に結合しp53依存的なアポトーシスを抑制する系を確立している.そこで,EWSがp53依存的なアポトーシスにどのように作用するかを明らかにする.また,β-cateninへの影響も現在検討中である.

EWS 是在尤文氏肉瘤中观察到的染色体相互易位 t(11;22) 中易位至 22q12 的基因（Nature 359, 162-165, 1992），是与 Fli1、ATF 和 WT1 的融合基因。 EWS由656个氨基酸组成，在其C端半部有RGG盒、RNA识别基序和锌指基序，但其原始功能尚不清楚。CBP（CREB-结合）的作用根本不为人所知。蛋白质具有三个富含半胱氨酸/组氨酸（C/H）结构域（CH1、CH2、CH3）、一个CREB结合区、一个溴结构域和一个富含谷氨酰胺结构域，并在进化过程中形成了各种功能结构域它由表明获得性潜力的特征结构组成。越来越清楚的是，复合物是通过这些结构域与包括基本转录因子在内的各种因子形成的。 CBP作为具有乙酰转移酶（HAT）活性的转录整合子（integrator）的整合转录控制机制正在引起人们的关注。有趣的是，申请人报道CBP和EWS是我们发现CBP和EWS在体外结合（未发表），因此，在2012年的公开应用研究中，我们重点关注以下两点，旨在阐明CBP和EWS相互作用的细胞生物学意义≪1≫鉴定。结合区域：详细阐明了EWS与CBP的结合区域。≪2≫细胞生物学意义Yoshi：通过去年的研究，申请人建立了一种β-连环蛋白与CBP的CH3区域结合并抑制p53依赖性细胞凋亡的系统，我们目前正在研究其对β-连环蛋白的影响。