骨芽細胞の分化におけるRNA Helicase A-Osterix相互作用の役割

RNA 解旋酶 A-Osterix 相互作用在成骨细胞分化中的作用

• 批准号: 20791340
• 负责人: 岡村 裕彦
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20791340/
• 关键词: Osterix; RNA Helicase A; 骨芽細胞; 相互作用

Osterixは骨芽細胞の分化に必須の転写調節因子であり、骨形成に必要な多数の蛋白質の発現を調節している。質量分析法にて同定したOsterix結合因子RNA Helicase A(RHA)が骨芽細胞とOsterixの機能に果たす役割について調べた。マウス骨芽細胞MC3T3-E1においてRNAi法を用いてRHAの発現を抑制し、細胞から蛋白質とmRNAを回収し、ウエスタンブロット法とリアルタイムPCR法を用いてALPやオステオカルシン等の骨分化マーカーの発現を調べた。また、タイプIコラーゲンプロモーターを含むルシフェラーゼベクターを作製し、ルシフェラーゼアッセイを行った。1. Osterix, RHAとも培養日数に伴い発現が上昇し、10日でピークを迎えた後減少した。2. OsterixはRHAのC末に存在するRNA結合ドメイン部に結合する。3. RHAの発現抑制に伴い骨分化マーカーの発現低下が認められた。4. RHAの発現抑制に伴いタイプIコラーゲンプロモーターに関する転写活性が低下した。以上の結果より、RHAはOsterixとの相互作用を介して骨分化マーカーの発現を制御することにより、骨芽細胞の分化を促進する働きを持つことが示唆された。

Osterix是成骨细胞分化所需的转移调节因子，并调节骨形成所需的许多蛋白质的表达。通过质谱法鉴定的RNA解旋酶A（RHA）鉴定出的Osterix结合因子检查了颠簸细胞和osterix的作用。小鼠成骨细胞MC3T3-E1抑制RHA，从细胞中恢复的蛋白质和mRNA的表达，并使用蛋白质印迹和实时PCR方法表达骨质疗法的表达，例如骨肉素。此外，制作了含有I型胶原蛋白启动子的荧光素酶矢量，并进行了荧光素酶测定。 1。由于培养天数的数量，Osterix和RHA都增加了，在10天内达到峰值后下降。 2。iosterix在RHA C末端与RNA结合域的部分结合。 3。由于抑制RHA的表达，观察到骨分裂标记的表达降低。 4。由于RHA表达的抑制，I型胶原蛋白启动子的转录活性已降低。以上结果表明，RHA具有通过与Osterix的相互作用来控制骨化标记的表达来促进成骨细胞的分化的功能。

项目成果

転写因子TWISTの標的因子の探索と扁平上皮癌細胞における発現

转录因子TWIST靶因子及其在鳞状细胞癌细胞中表达的寻找

• 发表时间: 2008
• 作者: 真野博;清水純;増原正明;羽毛田慈之;河田哲典;和田政裕;増原正明;Okamura Hirohiko;Okamura Hirohiko;岡村裕彦
• 通讯作者: 岡村裕彦

Streptococcus intermedilysinが誘導するヒト胆管上皮細胞死の分子機構の解明

中间链球菌素诱导人胆管上皮细胞死亡的分子机制的阐明

• 发表时间: 2008
• 作者: 真野博;清水純;増原正明;羽毛田慈之;河田哲典;和田政裕;増原正明;Okamura Hirohiko;Okamura Hirohiko;岡村裕彦;岡村裕彦;岡村裕彦
• 通讯作者: 岡村裕彦

PKRによるSTAT 1の発現調節機構の解明

阐明PKR对STAT 1表达的调控机制

• 发表时间: 2008
• 作者: 中目晴子;大泉丈史;船山ひろみ;山口晃史;黒石智誠;川村仁;菅原俊二;遠藤康男.;吉田賀弥
• 通讯作者: 吉田賀弥