Developments in biological assays by a noncompetitive detection of peptides

肽非竞争性检测生物测定的进展

• 批准号: 20360368
• 负责人: UEDA Hiroshi
• 金额: $ 7.99万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20360368/
• 关键词: 生物・生体工学; 分析科学; 蛋白質

Using an immunoassay that utilizes the antigen-dependent stabilization of antibody variable (Fv) regions (Open-sandwich immunoassay, OS-IA), we attempted to create systems for non-competitive sensitive detection of small molecular peptides, which was not measurable by conventional sandwich assays. Bypassing hybridoma, by utilizing newly developed phage display system for antibody Fab fragments, we succeeded in directly obtaining good antibodies for OS-IA from conjugate-immunized mice with thyroxine and an antigenic peptide from highly pathogenic influenza virus as antigens. Moreover, by OS-selection which is a method for affinity maturation using unconjugated small molecule antigens based on the OS-IA principle, we could improve the sensitivity for osteocalcin peptide by several hundred fold.

使用利用抗原依赖性抗体变量（FV）区域（开放式免疫测定，OS-IA）的免疫测定法，我们试图创建用于对小分子肽的非竞争性敏感检测的系统，这不是通过常规夹克分析来测量的。绕过杂交瘤，通过利用新开发的噬菌体展示系统作为抗体Fab片段，我们成功地直接从甲状腺素和甲状腺素的结合物免疫小鼠和一种抗原性肽中的OS-IA良好抗体从高度致病的流感病毒中作为抗原。此外，通过OS选择，这是一种基于OS-IA原理使用未结合的小分子抗原亲和力成熟的方法，我们可以提高对骨钙素肽的敏感性，从而提高数百倍。

项目成果

Formation of highly toxic soluble amyloid beta oligomers by the molecular chaperone prefoldin

• DOI: 10.1111/j.1742-4658.2008.06727.x
• 发表时间: 2008-12
• 期刊: The FEBS Journal
• 作者: M. Sakono;T. Zako;H. Ueda;M. Yohda;M. Maeda

Micro OS-ELISA: Rapid noncompetitive detection of a small biomarker peptide by open-sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (OS-ELISA) integrated into microfluidic device

• DOI: 10.1039/b915516c
• 发表时间: 2010-01-01
• 期刊: LAB ON A CHIP
• 影响因子: 6.1
• 作者: Ihara, Masaki;Yoshikawa, Amane;Ueda, Hiroshi
• 通讯作者: Ueda, Hiroshi

抗体融合タンパク質を用いた低分子センサーの創出

使用抗体融合蛋白创建小分子传感器

• 发表时间: 2008
• 作者: R.Tode;M.Matsuoka;M.Anpo;上田宏
• 通讯作者: 上田宏

第三の免疫測定法「オープンサンドイッチ法」の開発

开发第三种免疫分析方法“开放三明治法”

• 发表时间: 2008
• 期刊: 化学工学 72
• 作者: 伊原正喜;上田宏
• 通讯作者: 上田宏

コンビナトリアル・バイオエンジニアリング

组合生物工程

• 发表时间: 2010
• 作者: 上田宏;他;植田充美監修(共著)
• 通讯作者: 植田充美監修(共著)