ストレス応答性MAPキナーゼ系の肝再生における機能解析

应激反应性MAP激酶系统在肝再生中的功能分析

基本信息

批准号：
08J05261
负责人：
畠星治
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J05261/
关键词：
ストレス MAPキナーゼ JNK Hippo YAP 翻訳後修飾肝再生肝癌 SAPK 肝形成胎生致死遺伝子破壊 Cre-loxP 遺云子破壊

项目摘要

ストレス応答性MAPキナーゼであるJNK(別名SAPK)は、様々なストレスにより活性化し、細胞の生死を制御することで、種々の生理応答を引き起こすことが知られている。また、2003年に発見されたHippoシグナル系は、器官のサイズを制御するシグナル系として注目されている。申請者のグループでは、JNK系が、Hippoシグナル系とクロストークすること、また、マウスの肝臓ではHippo系が強く活性化していることを見出している。そこで肝再生時におけるJNKおよびHippo系の役割を解明することを目的に実験を行った。Hippo系の標的分子であるYAP転写共役因子の動態を観察する過程で、以下の知見を見出した。1)DNAアルキル化剤であるMMSによって、YAPは脱リン酸化され、細胞質から核へ移行すること、2)アセチル化酵素CBPによってYAPはそのC末端がアセチル化されること、3)このアセチル化部位はメダカ、マウス、ヒトで高度に保存されていること、また、4)アセチル化部位特異的な抗体を調製し、内在でもこの翻訳後修飾が誘導されること、さらに5)脱アセチル化酵素Sirtでこのアセチル化ははずされることを見出した。肝臓でYAPが過剰に発現したり、Hippo系が不活化すると、肝臓のサイズは数倍にまで膨れ上がり、最終的には肝癌が発症することが示されているが、今回見出されたMMSによるYAPのアセチル化は、再生肝のみならず病態肝発症の分子機構の解明に貢献すると考える。

JNK（也称为SAPK）是一种应力响应性图激酶，已知通过各种应力激活，并通过控制细胞生命和死亡来诱导各种生理反应。此外，2003年发现的河马信号系统已吸引了作为控制器官尺寸的信号系统的注意力。在申请人组中，发现JNK系统与河马信号系统串扰，并且河马系统在小鼠的肝脏中被强烈激活。因此，我们进行了一个实验，目的是阐明JNK和河马系统在肝脏再生过程中的作用。在观察YAP转录COUVER因子的动力学的过程中，发现了以下发现，这是河马系统的靶分子。 We found that 1) YAP is dephosphorylated by the DNA alkylating agent MMS and translocates from the cytoplasm to the nucleus, 2) YAP is acetylated at its C-terminus by the acetylase CBP, 3) this acetylation site is highly conserved in medaka, mice and humans, and 4) an antibody specific to acetylation site is prepared, and this post-translational modification即使处于固有态，也是5）脱乙酰基酶SIRT消除了这种乙酰化。已经表明，当YAP在肝脏中过度表达或河马系统被灭活时，肝脏大小将肿胀多次，肝癌最终会发展。但是，这次发现的MMS对YAP的乙酰化不仅会阐明再生肝脏，而且还有助于阐明肝脏病理发展的分子机制。