新規の神経突起伸長因子norbinによる神経可塑性機構

新型神经突生长因子 Norbin 介导的神经可塑性机制

基本信息

批准号：
11170262
负责人：
丸山敬
金额：
$ 4.03万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11170262/
关键词：
発生神経特異的遺伝子 norbin 分化神経突起伸長 neurochondrin 長期増強差分法

项目摘要

tetraethylammonium(TEA)処理によって海馬の広い領域の神経細胞で長期増強が誘引されると考えられる。TEA処理で発現が増大するクローンを検索し、3個の神経組織に特異的な遺伝子(KW8、KZ3、HE5)を特定した。その一つKW8はNeuroDとほぼ相同なbasic helix-loop-helix領域を持つ遺伝子であった。twohybrid法で検討したところ、この蛋白質のC末側には転写活性作用があり、転写因子であることはほぼ確実であるが、その生理機能は未だ不明である。このタンパク質は日本の他の研究グループにてNDRF(Neuro D related factor)として、アメリカのグループでNeuro D2として、我々の報告の数ヶ月後に相次いで発表され、この因子の注目度を伺わせる。現在、ドイツのグループと共同でノックアウトマウスを作成中である。HE5は神経突起伸長作用が培養細胞で見られ、norbinと命名した。norbinは中枢神経のみならず末梢神経の細胞質に存在していることを確認した。最近になり日本のグループから軟骨細胞を刺激しかつ神経に存在する因子として、norbinと同じ遺伝子がneurochondrinと命名された。我々もCOS細胞や神経系培養細胞neuro2aで分泌を確認することができた。また、脳のcDNAをカタログ化するプロジェクトではnorbinは非神経細胞にも存在するとRT-PCRで結論されてしまった。我々の追試では、これは末梢神経に発現しているためであり、norbinは中枢と末梢の神経細胞に特異的に発現していると結論した。ノックアウトマウスを作成を目指しているが、1000個以上のES細胞のスクリーニングを行っても相同組換え体が得られない。技術的な問題と染色体上の特異な領域にこの遺伝子が存在する可能性も考えられる。

据认为，四乙铵 (TEA) 治疗可诱导海马体大范围神经元的长期增强。我们搜索了 TEA 处理后表达增加的克隆，并鉴定了三个神经组织特异性基因（KW8、KZ3、HE5）。其中之一 KW8 是一个具有基本螺旋-环-螺旋区域的基因，与 NeuroD 几乎同源。使用twohybrid方法检查时，该蛋白的C末端具有转录激活作用，几乎可以肯定它是转录因子，但其生理功能仍不清楚。在我们报道几个月后，日本的另一个研究小组相继宣布该蛋白为NDRF（Neuro D相关因子），美国的一个研究小组将其命名为Neuro D2，可见该因子受到的关注程度。目前，他们正在与德国研究小组合作培育基因敲除小鼠。 HE5 被命名为 Norbin，因为在培养细胞中观察到其神经突生长效应。我们证实norbin不仅存在于中枢神经的细胞质中，而且还存在于周围神经中。最近，日本的一个研究小组将基因命名为neurochondrin，它与norbin相同，是一种刺激软骨细胞的因子，存在于神经中。我们还能够确认 COS 细胞和 Neuro2a 培养的神经系统细胞中的分泌。此外，在一项脑 cDNA 编目项目中，通过 RT-PCR 得出结论，norbin 也存在于非神经元细胞中。在我们的后续实验中，我们得出结论，这是因为它在周围神经中表达，并且norbin在中枢和周围神经细胞中特异性表达。我们的目标是创造基因敲除小鼠，但即使筛选了1000多个ES细胞，我们也未能获得同源重组体。还有技术问题以及该基因存在于染色体上的独特区域的可能性。