巨核球・血小板分化における転写因子ＨＥＳ１が担う制御機構の解明

阐明转录因子HES1在巨核细胞/血小板分化中的调控机制

• 批准号: 24790959
• 负责人: 錦井 秀和
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24790959/
• 关键词: 巨核球; 造血幹細胞; トロンボポエチン; Notch

巨核球・血小板分化制御機構の詳細を明らかにし、Notch-Hesシグナル制御による分化制御が可能か否か明らかにするために、最も巨核球分化に重要であると考えられているサイトカイン、TPOのレセプターであるc-mplの欠損マウスを用いて、実験を行った。c-mpl欠損マウスでは我々が同定した巨核球前駆細胞分画CD34+GPIba+細胞(34a-MKP)の頻度、造血幹細胞分画は激減していた一方、従来考えられてきた赤血球・巨核球共通前駆細胞(MEP)分画の頻度には著変を認めなかった。一方、細胞周期特異的抗癌剤である5-FUや抗血小板抗体投与によって作成した実験的血小板減少モデルの骨髄を詳細に解析すると、MEP分画の著増が認められた。この事は血小板需要が高まった時の血小板供給にはc-Mpl/TPO非依存的な制御機構が関与している事を示唆していると考えた。また、MEP分画をはじめ、骨髄前駆細胞にはNotch2が発現している事をRT-PCR法、フローサイトメトリーで確認した。その下流シグナル分子であるHes1の発現もMEP分画,34a-MKPで比較的高い発現を示している事から、血小板需要に応じた血小板供給にはNotch-Hesシグナルが役割を担っている可能性が考えられた。また、Notch分子のリガンドであるDeltaは骨髄内免疫染色で観察するとDelta1は骨芽細胞近傍に、Delta4は血管内皮を中心とした血管近くに局在していた。Delta4発現細胞近傍に34a-MKPは有意に局在している事からもDelta4-Notch-Hes経路が役割を担っている事が考えられた。さらにc-Mpl欠損マウスにDelta4の阻害抗体を投与すると更なる血小板減少が認められた。現在、c-Mpl/TPO非依存的血小板産生機構の意義とDelta-Notch-Hesシグナルの関係性ついて更なる研究を行っている。

为了阐明控制巨核细胞/血小板分化的机制的细节，并阐明分化是否可以通过Notch-Hes信号控制来控制，我们研究了被认为对巨核细胞分化最重要的细胞因子TPO的受体。使用 c-mpl 缺陷小鼠进行。在 c-mpl 缺陷小鼠中，我们鉴定的巨核细胞祖细胞组分 CD34+GPIba+ 细胞 (34a-MKP) 和造血干细胞组分的频率显着降低，但细胞 (MEP) 的频率没有观察到显着变化。 ) 分数。另一方面，通过给予细胞周期特异性抗癌药物 5-FU 和抗血小板抗体创建的实验性血小板减少症模型的骨髓的详细分析显示，MEP 分数显着增加。这表明当血小板需求增加时，不依赖于 c-Mpl/TPO 的控制机制参与血小板供应。此外，我们通过RT-PCR和流式细胞术证实Notch2在骨髓祖细胞（包括MEP部分）中表达。下游信号分子 Hes1 在 MEP 组分 34a-MKP 中的表达也相对较高，这表明 Notch-Hes 信号可能在响应血小板需求的血小板供应中发挥作用。此外，通过髓内免疫染色观察到Notch分子的配体Delta，Delta1位于成骨细胞附近，Delta4位于血管附近，主要位于血管内皮。 34a-MKP 明显位于表达 Delta4 的细胞附近，这一事实表明 Delta4-Notch-Hes 途径发挥了作用。此外，当对c-Mpl缺陷小鼠施用Delta4抑制性抗体时，观察到进一步的血小板减少症。我们目前正在对不依赖于c-Mpl/TPO的血小板产生机制的意义以及Delta-Notch-Hes信号之间的关系进行进一步的研究。

项目成果

筑波大学血液内科研究内容 (造血幹細胞の維持機構と血球分化機構の解明）

筑波大学血液学系的研究内容（造血干细胞的维持机制和血细胞分化机制的阐明）

Identification of a new class of megakaryocyte progenitors in the mouse bone marrow.

小鼠骨髓中一类新的巨核细胞祖细胞的鉴定。

• 作者: 江里俊樹;今村充;他;錦井 秀和;松下 賢司 （研究代表者は第２演者）
• 通讯作者: 松下 賢司 （研究代表者は第２演者）

Implication of distinct differentiation pathway of megakaryocytes from hematopoietic stem cells in the mouse bone marrow.

小鼠骨髓中巨核细胞与造血干细胞不同分化途径的意义。

• 作者: 江里俊樹;今村充;他;錦井 秀和;松下 賢司 （研究代表者は第２演者）;Hidekazu Nishikii
• 通讯作者: Hidekazu Nishikii

Identification of monolineage megakaryocyte progenitor through a previously unidentified differentiation pathway.

通过先前未知的分化途径鉴定单系巨核细胞祖细胞。

• 作者: 江里俊樹;今村充;他;錦井 秀和
• 通讯作者: 錦井 秀和