Nampt阻害による肺癌増殖抑制効果の検証

验证Nampt抑制对肺癌生长的抑制作用

• 批准号: 23790891
• 负责人: 奥村 俊介
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23790891/
• 关键词: lung cancer; Nampt; EGFR; EGFR-gene mutation

計画した研究目的・計画に則って、(1)肺癌のNampt阻害による腫瘍増殖抑制効果の検証と、(2)Nampt阻害による腫瘍増殖抑制効果の作用機序の検証を行った。まず、RT-PCRを用いた実験で、肺癌細胞では正常細胞に比べてNampt mRNAの発現量が高いことがわかった。次に、数種の肺癌細胞株を用いてNampt阻害薬の抗腫瘍効果を評価したところ、EGFR遺伝子変異を有する細胞株で、高い抗腫瘍効果が確認された。さらに、EGFR阻害薬に耐性のEGFR遺伝子変異をもつ肺癌細胞株でも、高い抗腫瘍効果が認められた。次に、肺癌細胞内の増殖シグナル活性の変化を比較したところ、Nampt阻害によって、肺癌の生存・増殖に関わるEGFR系のシグナルが抑制されることが明らかとなった。さらに、Nampt阻害薬の投与で、これら肺癌細胞株にアポトーシスが誘導されることを確認した。肺癌における変異EGFRは、細胞増殖の際に細胞内のATPを多量に取り込むことが知られている。一方、Namptは細胞内ATPの生合成に寄与するという報告があるため、Nampt阻害による肺癌細胞内ATPの合成阻害が、抗腫瘍効果の作用機序ではないかと考えられた。ATPアッセイを行ってこれを検証したところ、Nampt阻害により肺癌細胞内のATP濃度が減少することがわかった。マウスを用いたIn vivo実験でも、in vitro実験と同様にNampt阻害剤による移植肺癌の増殖抑制効果が確認された。また、Nampt阻害剤を投与した移植腫瘍で免疫染色を行ったところ、EGFRの下流シグナルの活性が抑制されていることが明らかとなった。本研究により、肺癌細胞のNamptを阻害すると、(1)細胞内ATP合成能が低下し、(2)EGFRシグナル活性が抑制され、(3)細胞増殖抑制効果・アポトーシスが誘導されることが明らかとなった。以上の一連の研究・検証は、国内外でも初めての試みであり、肺癌の新たな治療ターゲットの確立に寄与する可能性が示唆された。我々はこの成果を国際学会で発表し、英論文として世界に公表した。

根据计划的研究目的和计划，（1）验证由于NAMPT抑制肺癌引起的肿瘤增殖抑制作用，以及（2）通过抑制肿瘤增殖而抑制肿瘤增殖抑制的作用机理。首先，使用RT-PCR的实验表明，肺癌细胞中NAMPT mRNA表达高于正常细胞。接下来，评估了使用多个肺癌细胞的NAMPT抑制剂的抗肿瘤作用，并确认具有EGFR基因突变的细胞储备中证实了高抗肿瘤作用。此外，具有对EGFR抑制剂具有抗性EGFR基因突变的肺癌细胞也因其高抗肿瘤作用而被识别。其次，比较肺癌细胞增殖活性的变化，很明显，NAMPT抑制抑制了与肺癌存活和增殖有关的基于EGFR的信号。此外，已经证实，NAMPT抑制剂的给药会诱导这些肺癌细胞的凋亡。已知肺癌中的突变EGFR在细胞增殖过程中掺入细胞中的大量细胞。另一方面，自从NAMPT有助于细胞内ATP的生物合成以来，人们认为由于NAMPT抑制而导致的内肺癌ATP的合成可能是抗肿瘤作用的作用机理。进行了ATP测定法并证明它表明NAMPT抑制降低了肺癌细胞中的ATP浓度。使用小鼠进行体内实验，正如体外实验所述，通过NAMPT抑制剂对移植肺癌育种的影响。具有NAMPT抑制剂的移植肿瘤的免疫材料表明，EGFR的下游信号的活性被抑制。这项研究表明（1）内部ATP合成能力降低，（2）EGFR信号活性被抑制，（3）诱导细胞生长抑制作用和凋亡。以上一系列的研究和验证是日本和海外的首次尝试，这表明有可能为建立新的肺癌治疗靶标。我们在国际学会上发表了这一结果，并以英语论文出版了世界。