上皮間葉移行における腫瘍浸潤能獲得の解明とヒストン修飾と腫瘍悪性化の関連性

阐明上皮间质转化过程中肿瘤侵袭能力的获得及组蛋白修饰与肿瘤恶性的关系

• 批准号: 19659379
• 负责人: 尾崎 敏文
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19659379/
• 关键词: 上皮間葉移行; ヒストン修飾; 滑膜肉腫; 腫瘍悪性化

今回の研究では、我々が確立した腫瘍組織浸潤モデルマウスを使用し、軟部腫瘍におけるヒストン修飾と腫浸潤能獲得との関連性をEpithelial-Mesenchymal Transition (EMT;上皮間葉移行)の理論のもと、HDAC複合体関連因子によるE-Cadherinの発現調節の解析を目的とする。21年度 に、ヒストン修飾とEMT関連遺伝子の発現、SYO-1細胞の初代培養細胞からの新たな細胞株の樹立(SYO-1e細胞)を行った。アセチル化ヒストンH4に対する抗体を用いたクロマチン免疫沈降法(ChIP assay ; Chromatin Immunoprecipitation Assay)により,p21プロモーター領域の結合について検討を行った。HDAC阻害剤添加により、RT-PCR法では,p21mRNAはHDAC阻害剤添加により継時的に発現が増強された。また,Western blotによりp21の蛋白発現においても継時的に発現が増強された。また、ChIP assayではHDAC阻害剤添加によりp21プロモーター領域のp53結合ドメインへの結合を認め、p21蛋白発現を制御すると考えられた。分離されたSYO-1e細胞はin vitroにおいて、上皮様形態を示し、上皮系マーカーの発現を認めたが、HDAC阻害剤によるE-cadherin遺伝子の発現変化に差を認めなかった。現在In vivoにおける滑膜肉腫細胞株の細胞間接着能について検討している。今後さらに条件を検討しHDAC関連因子におけるE-cadherin発現調整を検討し軟部腫瘍におけるヒストン修飾と腫瘍浸潤能獲得について研究を続ける。

本研究利用我们建立的肿瘤组织侵袭模型小鼠，基于上皮间质转化（EMT）理论，探讨软组织肿瘤中组蛋白修饰与肿瘤侵袭能力获得的关系。本研究旨在分析HDAC复合物相关因素对E-Cadherin表达的调控。 2011财年，我们进行了组蛋白修饰和EMT相关基因的表达，并从原代培养的SYO-1细胞中建立了新的细胞系（SYO-1e细胞）。使用抗乙酰化组蛋白 H4 的抗体通过染色质免疫沉淀测定（ChIP 测定）研究与 p21 启动子区域的结合。通过 RT-PCR，p21 mRNA 的表达随着时间的推移通过添加 HDAC 抑制剂而增强。蛋白质印迹分析还表明，p21 蛋白表达随着时间的推移而增强。此外，在 ChIP 测定中，通过添加 HDAC 抑制剂观察到与 p21 启动子区域的 p53 结合域的结合，表明它调节 p21 蛋白表达。在体外，分离的SYO-1e细胞表现出上皮样形态并表达上皮标记物，但HDAC抑制剂未观察到E-钙粘蛋白基因表达的差异。我们目前正在研究滑膜肉瘤细胞系的体内细胞粘附能力。未来，我们将进一步考察条件，考察HDAC相关因子对E-cadherin表达的调控，并继续研究软组织肿瘤中的组蛋白修饰和肿瘤侵袭能力的获得。

项目成果

骨肉腫とEwing肉腫に対するヨーロッパ大規模Study

欧洲针对骨肉瘤和尤文氏肉瘤的大规模研究

• 发表时间: 2007
• 作者: 吉田晶;国定俊之;尾崎敏文;他;尾崎 敏文
• 通讯作者: 尾崎 敏文

Frequent methylation of RASSFIA in synovial sarcoma and the anti-tumor effects of 5-aza-2'-deoxycytidine against synovial sarcoma cell lines.

滑膜肉瘤中 RASSFIA 的频繁甲基化以及 5-aza-2-脱氧胞苷对滑膜肉瘤细胞系的抗肿瘤作用。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Journal of cancer research and clinical oncology 136
• 作者: Numoto K;Yoshida A;Sugihara S;Kunisada T;Morimoto Y;Yoneda Y;Fujita Y;Nishida K;Ouchida M;Ozaki T
• 通讯作者: Ozaki T

各論-主要疾患の病期・病態別治療法-骨軟部腫瘍

具体内容 - 主要疾病分期、病情的治疗方法 - 骨与软组织肿瘤

• 发表时间: 2007
• 期刊: Medical Practice 24
• 作者: 国定 俊之;尾崎 敏文
• 通讯作者: 尾崎 敏文

ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤とDNA脱メチル化剤の併用による滑膜肉腫細胞株に対する抗腫瘍効果の検討

组蛋白脱乙酰酶抑制剂和DNA去甲基化剂联合使用对滑膜肉瘤细胞系的抗肿瘤作用研究

• 发表时间: 2008
• 作者: 佐藤千明;国定俊之;尾崎敏文;他
• 通讯作者: 他

滑膜肉腫細胞株SYO-1初代培養細胞からの新しい細胞株の樹立

滑膜肉瘤细胞系 SYO-1 从原代培养细胞建立新细胞系

• 发表时间: 2008
• 作者: 吉田晶;国定俊之;尾崎敏文;他
• 通讯作者: 他