Analysis of salivary amino acids associated with physiologichalitosis and investigation of inhbitor against oral malodor

与生理性口臭相关的唾液氨基酸分析及口臭抑制剂的研究

基本信息

批准号：
19592407
负责人：
HINODE Daisuke
金额：
$ 2.91万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

生理的口臭患者における口臭生成機序解明のため, まず, その背景となる生活環境要因に着目して統計解析を行った。徳島大学病院口臭外来を受診し, 口臭検査を実施した18-59歳の244名を対象に, 生活習慣や舌苔沈着量と口臭との関連性を調べた結果, 舌苔沈着量は口臭の存在と統計学的に有意な関連性を示した。一方, 中等度以上の舌苔沈着の認められる患者で, 自分の舌苔の存在を認識している者は半数以下であり, 舌苔を認識していても舌清掃を行っていない者が40%以上存在した。喫煙習慣との関連性では, 喫煙者の口臭外来を受診する割合は全国調査値の喫煙者割合の半数以下であり, 喫煙者は自分の口臭が認識できていない可能性が示唆された。また, 真性口臭症患者では喫煙経験(ブリンクマン指数)が舌苔形成と有意な関連性を示すことが明らかとなった。生理的口臭を含む真性口臭症患者(18名)から得られた唾液検体を用いて, シスタチンCの存在をWestern immunoblotting法にて, 半定量的に測定した。それらの結果を用いて, リアルタイムPCRによる唾液および舌苔中の総菌数, Porphyromonas gingivalis(P.g.)およびFusobacterium mucleatum(F.n.)の菌数測定結果や他の口臭に関与する臨床データとの関連性を調べた。スピアマンの順位相関係数検定の結果, 唾液中のシスタチンC量はハリメーター値(揮発性硫黄化合物量 : VSC)との問に有意な逆相関(相関係数-0.53, p<0.05)を認め, 特にガスクロマトグラフィーにて測定したメチルメルカプタン量との問の逆相関(相関係数-0.48, p<0.05)が確認された。一方, 2名の生理的口臭患者に対してブラッシング指導, PMTCなどを行い, 介入前後の唾液検体を採取して口臭産生の基質となる含硫黄アミノ酸量の変化を調べた。その結果, 口臭の改善した2名ともcystine量に大きな変化は認められなかったが, 1名は介入後のmethionine(Met)量が大きく減少した。メチルメルカプタンはMetから産生されることや唾液中のシスタチンCが口臭産生抑制に深く関与することから, これらの結果は唾液中のMet測定およびシスタチンC測定が口臭症治療のバイオマーカーとなる可能性を示唆するものである。また, カナダ・ラバル大学より供与を受けた高分子クランベリー抽出物を用いてP.g.およびF.nの産生する硫化水素およびメチルメルカプタン産生量への影響を調べた。それぞれの口臭関連細菌培養液に抽出物を添加した結果, P.g.の産生するメチルメルカプタン産生を部分的に抑制する傾向が認められ, クランベリーの口臭ケアへの応用の可能性が見い出された。

为了阐明生理性口臭患者口臭产生的机制，我们首先针对其背后的生活方式环境因素进行了统计分析。我们对前往德岛大学医院口臭门诊进行口臭检查的 244 名 18 岁至 59 岁的人进行了生活习惯、舌苔量和口臭之间的关系调查。结果发现，舌苔量与口臭之间的关系与口臭的存在相关，显示出统计学上显着的关联。另一方面，只有不到一半的中度或以上舌苔患者意识到舌苔的存在，并且超过40%的意识到舌苔的患者没有清洁舌头。关于与吸烟习惯的关系，去口臭门诊就诊的吸烟者比例还不到全国调查中吸烟者比例的一半，这表明吸烟者可能并没有意识到自己的口臭。此外，研究还发现，吸烟经历（布林克曼指数）与口臭患者的舌苔显着相关。使用从 18 名口臭（包括生理性口臭）患者获得的唾液样本，通过蛋白质免疫印迹法半定量测定胱抑素 C 的存在。利用这些结果，我们通过实时PCR研究了唾液和舌苔中细菌总数、牙龈卟啉单胞菌（P.g.）和粘液梭杆菌（F.n.）细菌数量以及与口臭相关的其他临床数据的关系。塔。 Spearman等级相关系数检验的结果表明，唾液中半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的量与halimeter值(挥发性硫化合物量：VSC)之间存在显着的负相关(相关系数-0.53，p<0.05)。确认与气相色谱法测定的甲硫醇量呈负相关(相关系数-0.48，p<0.05)。另一方面，我们对两名生理性口臭患者进行刷牙指导和PMTC，采集干预前后的唾液样本，检测口臭产生底物含硫氨基酸含量的变化。结果，两名口臭改善的患者的胱氨酸含量没有观察到显着变化，但一名患者的蛋氨酸（Met）含量在干预后显着下降。由于唾液中的甲硫醇由 Met 产生，而胱抑素 C 与抑制口臭产生密切相关，因此这些结果表明，唾液 Met 和胱抑素 C 测量可作为治疗口臭的生物标志物。此外，使用加拿大拉瓦尔大学提供的高分子蔓越莓提取物研究了P.g.和F.n对硫化氢和甲硫醇产生的影响。将提取物添加到各种口臭相关细菌的培养液中，结果观察到部分抑制P.g.产生的甲硫醇的产生的趋势，并且发现了将蔓越莓应用于口臭护理的可能性。