HTRA1関連脳小血管病の罹患者数を推計する試み

尝试估计受 HTRA1 相关脑小血管疾病影响的患者数量

• 批准号: 17K09775
• 负责人: 野崎 洋明
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17K09775/
• 关键词: HTRA1; 脳小血管病; CARASIL; 優性阻害効果; 脳神経疾患

HTRA1遺伝子変異による HTRA1プロテアーゼ活性の低下は脳小血管病を引き起こす。報告者は、劣性遺伝形式で発症する稀な病態と考えられていたHTRA1関連脳小血管病が、優性阻害効果によって優性遺伝形式でも発症することを明らかにした。しかし、本症の罹患者数は不明である。本研究課題では、遺伝子多型データベースに登録されたHTRA1遺伝子多型の優性阻害効果に焦点を当て、病的な多型を選別し、そのアレル頻度からHTRA1関連脳小血管病の罹患者数を推計することを目的とした。昨年度までに、次の方法によって、HTRA1プロテアーゼ活性が低下する多型を選別した。約120,000アレル分のデータを統合したExAC Browserを用いて、アミノ酸置換を伴うHTRA1遺伝子の一塩基多型118種から、①アレル頻度が1/100,000以上、②PolyPhen-2によるスコアが0.5以上(最小0、最大1.0)、③アミノ酸の置換部位がプロテアーゼドメインに位置するという3つの条件を全て満たす多型10種を選択し、それぞれの精製蛋白を作成した後、FITCでラベルしたβカゼインを基質として酵素活性を測定したところ、いずれの多型も野生型に比して HTRA1プロテアーゼ活性が有意に低下することを確認した。本年度は、この10種の多型について、優性阻害効果の有無を検討した。優性阻害効果については、多型HTRA1と野生型HTRA1を混合した精製蛋白を作成し、FITCでラベルしたβカゼインを基質として酵素活性を測定することによって評価した。その結果、優性阻害効果を示す多型は見いだせなかった。以上の結果から、HTRA1関連脳小血管病は稀な疾患であると結論した。

HTRA1基因突变引起的HTRA1蛋白酶活性降低会导致小血管疾病。记者透露，HTRA1相关的脑小血管疾病被认为是一种罕见的疾病，以隐性遗传形式发展，由于其主要的抑制作用，也以优势形式发展。但是，该疾病影响的病例数量尚不清楚。该研究主题的重点是在遗传多态性数据库中注册的HTRA1基因多态性的主要抑制作用，旨在选择病理多态性，并估计基于其他等位基因的频率，估计了HTRA1相关的脑相关小脑小血管疾病的受影响的患者的数量。 Until last year, polymorphisms that reduce HTRA1 protease activity were selected by the following methods: Using an ExAC Browser that integrates data for approximately 120,000 alleles, we selected 10 polymorphisms that meet all three conditions: 1) allele frequency or more, 2) PolyPhen-2 scores or more (minimum 0, maximum 1.0), and 3) amino acid substitution sites are located in the protease domain, and after each purified protein was创建的是，使用用FITC标记为底物的β-酶素来测量酶活性，并证实与野生型相比，所有多态性的HTRA1蛋白酶活性显着降低。今年，我们研究了这10种多态性是否具有显性抑制作用。通过制备与多态性HTRA1和野生型HTRA1混合的纯化蛋白质，并使用FITC标记的β-Casein作为底物评估酶活性，从而评估了显性抑制作用。结果，未发现显示出主要抑制作用的多态性。从以上结果得出结论，与HTRA1相关的小血管疾病是一种罕见的疾病。

项目成果

The frequency of mutations in NOTCH3 or HTRA1 gene among Japanese CSVD patients

日本脑小血管病患者NOTCH3或HTRA1基因突变频率

• 发表时间: 2018
• 作者: Hiroaki Nozaki;Masahiro Uemura;Osamu Onodera
• 通讯作者: Osamu Onodera