タンパク質相互作用を介したＣａＭＫホスファターゼのダイナミックな制御メカニズム

CaMK磷酸酶通过蛋白质相互作用的动态控制机制

基本信息

批准号：
15J07644
负责人：
小野内貴士
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J07644/
关键词：
CaMKP CaMK キナーゼホスファターゼ Pcdh-γC5 CaMKI

项目摘要

カルシウムイオンは神経機能の様々な制御に重要な役割があり、また多機能性CaMKsの活性化に重要である。多機能性CaMKsは学習や記憶などの神経機能の制御に関与し、カルシウムシグナル経路に重要な役割を持つ。CaMKPはラット脳から精製された、CaMKI、CaMKIIとCaMKIVに対して特異性の高いホスファターゼとして報告された。以前の論文でCaMKPにpoly(Lys)が結合することによって基質との複合体を形成することが明らかとなり、CaMKPはより基質を脱リン酸化するようになることがin vitroにおいて示された。しかしながら、in vivoにおいてpoly(Lys)と同様の機能を持つCaMKPの活性調節因子はまだ見つかっていない。またpoly E配列は種間で高度に保存されており、poly E配列に結合する生理的な因子を同定することは重要な課題である。今回の研究で、CaMKPがPcdh-γC5の細胞質領域だけのコンストラクトであるPcdh-γC5 (715-944)と相互作用し、Pcdh-γC5(715-944)の細胞内局在を制御することを明らかにされた。また、リン酸化CaMKIを基質に脱リン酸化アッセイを行ったところ、in vitroまたはin vivoにおいてPcdh-γC5(715-944)の結合によりCaMKPは顕著にリン酸化CaMKIを脱リン酸化した。GSTプルダウンにより、CaMKP, CaMKIとPcdh-γC5(715-944)は三者複合体を形成したことから、Pcdh-γC5(715-944)は足場の役割を果たしCaMKPの活性制御に寄与する可能性が考えられた。これらの結果より、Pcdh-γC5(715-944)はCaMKPの内在性のpositive regulatorであることが強く示唆された。

钙离子在神经功能的各种控制中具有重要作用，对于激活多功能凸轮很重要。多功能CAMK参与了神经功能（例如学习和记忆）的控制，并且在钙信号途径中具有重要作用。据报道，CAMKP是一种高度特异性的Hosfatase，用于CAMKI，CAMKII和CAMKIV，一种精致的大鼠脑。在上一篇论文中，Poly（Lys）与CAMKP结合以与底物形成复合物，并且体外表明CAMKP将更多地去除底物。但是，在体内没有与poly（lys）相同的函数的CAMKP活性控制因子。多个阵列高度存储在该物种中，这是确定生理因子与多e序列结合的重要问题。在这项研究中，CAMKP与PCDH-γC5（715-944）相互作用，该构建体仅用于PCDH-γC5的细胞遗传区域，以控制PCDH-γC5的内部区域（715-944）。此外，当通过CAMKI氧化物作为底物引起测定时，CAMKP被PCDH-γC5（715-944）在体外或体内被明显清除。由于CAMKP，CAMKI和PCDH-γC5（715-944）由于GST下拉而形成了三方复合体，因此PCDH-γC5（715-944）可能在脚手架中起作用，并认为有助于CAMKP活动。这些结果表明，PCDH-γC5（715-944）是CAMKP的正调节剂。