アンジオポエチン様因子2の毛嚢バルジ幹細胞維持への関与の検討

血管生成素样因子 2 在毛囊膨出干细胞维持中的作用研究

• 批准号: 19790802
• 负责人: 清水 篤
• 金额: $ 2.36万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19790802/
• 关键词: 再生医学; 細胞・組織; 毛嚢; 幹細胞

研究計画初年度である平成19年度は、申請書にあるように1.マウス髭およびヒト毛嚢におけるAngpt12発現部位および分泌細胞の同定および、2.Angpt12蛋白の作製と同時に、3.in vitroでのバルジ幹細胞の増殖能に与えるAngpt12の影響の評価の確立を試みた。すでに予備実験としてマイクロダイセクション法を用いてマウス髭でのAngpt12mRNAが毛嚢幹細胞のニッシエであるバルジ領域に強く発現していることを確認済みであるが、ヒトにおいてもバルジを含まない毛嚢上部・下部、バルジ領域を含む毛嚢中部に3分割し解析した結果、マウスと同じくバルジ領域にAngpt12の強い発現が認められ、ヒト毛嚢においてもAngpt12が幹細胞維持に何らかの役割を果たしている可能性が示唆された。Angpt12分子の毛嚢幹細胞へ関与を評価するためには、培養による評価系が必要であり、添加する組み替えヒトAngpt12蛋白を、バキュロウイルス発現系にて作成した。完成した蛋白は分子量約70kDaのAngpt12分子であることをウェスタンプロット法にて確認済みである。毛嚢バルジ細胞は頭皮由来表皮細胞に比べ速い増殖速度を維持し、高いコロニー形成能(ホ口クローン性)を維持し続ける。この特性がin vitroにおけるバルジ細胞の幹細胞的特性の一つとされる。 Angpt12がバルジ細胞に与える影響を検討するためにはこの培養系の安定化が必須であったため、ヒト頭皮サンプルを用いて培養系を確立した。

2007财年，即研究计划的第一年，如申请中所述，1.鉴定小鼠胡须和人毛囊中的Angpt12表达位点和分泌细胞，2.同时生产Angpt12蛋白，以及3我们试图评估 Angpt12 对凸起干细胞增殖能力的影响。作为初步实验，我们已经使用显微解剖证实了小鼠胡须中Angpt12 mRNA在凸起区域（毛囊干细胞的生态位）强烈表达，但在人类中也证实了Angpt12 mRNA强烈表达隆起部位，是毛囊干细胞的栖息地。 ・由于将毛囊分为三个部分，包括凸起区的下部和中部，在凸起区观察到Angpt12的强表达，如在小鼠中，这表明Angpt12可能在维持干细胞中发挥作用。人类毛囊细胞也完成了。为了评估Angpt12分子对毛囊干细胞的参与，需要基于培养的评估系统，并且使用杆状病毒表达系统创建要添加的重组人Angpt12蛋白。经Western blotting证实，完成的蛋白为Angpt12分子，分子量约为70 kDa。毛囊凸出细胞比头皮源性表皮细胞保持更快的增殖速度，并持续保持高集落形成能力（克隆性）。这一特性被认为是体外凸出细胞的干细胞特性之一。由于为了检查 Angpt12 对凸起细胞的影响，稳定该培养系统至关重要，因此我们使用人类头皮样本建立了培养系统。

项目成果

犬毛包におけるメラニン輸送メカニズムの形態学的検討 健常犬とColor dilution alopecia罹患大の比較

狗毛囊中黑色素运输机制的形态学研究。健康狗和受颜色稀释性脱发影响的狗的比较。

• 发表时间: 2007
• 期刊: 獣医臨床皮膚科 13
• 作者: 清水 篤;他4名
• 通讯作者: 他4名

Ebastin, a second-generation antihistamin, as a supportive medication for alopecia areata.

依巴斯汀，第二代抗组胺药，作为斑秃的支持药物。

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimizu A;et. al.
• 通讯作者: et. al.

ヒト毛乳頭のmolecular segnature の解析毛乳頭の何か特別なのか?

人体真皮乳头的分子特征分析 真皮乳头有什么特别之处吗？

• 发表时间: 2007
• 作者: 大山 学;他2名
• 通讯作者: 他2名