低酸素応答系遺伝子発現における転写制御の解明

阐明缺氧反应系统基因表达的转录调控

• 批准号: 19790658
• 负责人: 小原 直
• 金额: $ 2.36万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19790658/
• 关键词: 低酸素; エリスロポエチン; 組織特異的遺伝子発現; 腎性貧血; 転写因子; トランスジェニックマウス; BAC; エンハンサー

エリスロポエチン(Epo)遺伝子の近傍180kbpの制御領域下で緑色蛍光タンパク質(GFP)を発現するトランスジェニックマウス(wt-Epo-GFP Tg)を作製し、マウス個体におけるEpo産生細胞を同定した。また、同様の構築の中のプロモーター領域のGATA配列に変異を導入したトランスジェニックマウスを作成・解析したところ、腎遠位尿細管・集合管、肝内胆管、気管支上皮、胸腺髄質などの上皮系細胞において、恒常的にGFPを発現していた。また、遠位尿細管では転写因子GATA-2,GATA-3が発現しており、Epo遺伝子のプロモーター領域に存在するGATA配列は、個体において、恒常的にEpo遺伝子の異所性発現を抑制していることを明らかにできた。また、遠位尿細管や集合管での抑制にはGATA-2、GATA-3が関与していることが示唆された。さらに、さまざまな長さのEpo遺伝子制御領域下でGFPを発現するトランスジーンを保持するトランスジェニックマウスを作成し、解析した。その結果、転写開始点から上流17kbの制御領域をもつトランスジーンを保持するトランスジェニックマウスでは腎臓・肝臓でGFPの発現を認めたのに対し、上流13kbの制御領域をもつトランスジーンでは肝臓でのみGFPの発現を認めた。このことからマウス個体では腎臓と肝臓で異なる制御機構によりEpo遺伝子の誘導的発現が制御されていることが示された。また、これらのトランスジェニックマウスの結果からEpo遺伝子の腎臓特異的エンハンサーは転写開始点から上流13kbから17kbの部位に存在すると考えられる。

我们创建了一种转基因小鼠 (wt-Epo-GFP Tg)，它在促红细胞生成素 (Epo) 基因附近的 180 kbp 调控区下表达绿色荧光蛋白 (GFP)，并鉴定了个体小鼠中的 Epo 生成细胞。此外，我们创建并分析了转基因小鼠，其中在类似构建体的启动子区域中的GATA序列中引入了突变，并发现上皮系统如肾远端小管/集合管、肝内胆管、支气管上皮和胸腺髓质 GFP 在细胞中持续表达。此外，转录因子GATA-2和GATA-3在远曲小管中表达，并且Epo基因启动子区域中存在的GATA序列持续抑制个体中Epo基因的异位表达。此外，有人提出GATA-2和GATA-3参与远端小管和集合管的抑制。此外，还生成并分析了携带在不同长度的Epo基因调控区下表达GFP的转基因的转基因小鼠。结果，在携带转录起始位点上游 17 kb 调节区的转基因的转基因小鼠中，在肾脏和肝脏中观察到 GFP 表达，而对于携带上游 13 kb 调节区的转基因，GFP 仅在肾脏和肝脏中表达。观察肝脏的 GFP 表达。这表明Epo基因的诱导表达受到个体小鼠肾脏和肝脏中不同调节机制的控制。此外，根据这些转基因小鼠的结果，认为Epo基因的肾脏特异性增强子存在于转录起始位点上游13至17kb的位点。

项目成果

組織球性壊死性リンパ節炎および血球食食症候群を合併したマイコプラズマ肺炎の一例

支原体肺炎并发组织细胞坏死性淋巴结炎及噬血细胞综合征一例

• 发表时间: 2007
• 作者: Katsura Y;Suzukawa K;Nanmoku T;Nemoto N;Machino T;Obara N;Okoshi Y;Mukai HY;Hasegawa Y;Kojima H;Nagasawa T.;佐藤智咲・鈴木教郎・小原直・山嵜瞬・潘小青・今川重彦・山本雅之;松本健・今川重彦・小原直・鈴木教郎・長澤俊郎・山本雅之;小原直・大越靖・鈴川和己・向井陽美・長谷川雄一・小島 寛・長澤俊郎;越野繭子・向井陽美・武藤秀治・小原直・大越靖・鈴川和己・長谷川雄一・小島寛
• 通讯作者: 越野繭子・向井陽美・武藤秀治・小原直・大越靖・鈴川和己・長谷川雄一・小島寛

2-オキソグルタル酸投与による腫瘍血管新生抑制効果

2-酮戊二酸给药对肿瘤血管生成的抑制作用

• 发表时间: 2007
• 作者: Katsura Y;Suzukawa K;Nanmoku T;Nemoto N;Machino T;Obara N;Okoshi Y;Mukai HY;Hasegawa Y;Kojima H;Nagasawa T.;佐藤智咲・鈴木教郎・小原直・山嵜瞬・潘小青・今川重彦・山本雅之;松本健・今川重彦・小原直・鈴木教郎・長澤俊郎・山本雅之
• 通讯作者: 松本健・今川重彦・小原直・鈴木教郎・長澤俊郎・山本雅之

血中サイトカインを用いた鼻型NK/H細胞リンパ腫の予後・病態解析

血液细胞因子对鼻型NK/H细胞淋巴瘤的预后及病理分析

• 发表时间: 2007
• 作者: Katsura Y;Suzukawa K;Nanmoku T;Nemoto N;Machino T;Obara N;Okoshi Y;Mukai HY;Hasegawa Y;Kojima H;Nagasawa T.;佐藤智咲・鈴木教郎・小原直・山嵜瞬・潘小青・今川重彦・山本雅之;松本健・今川重彦・小原直・鈴木教郎・長澤俊郎・山本雅之;小原直・大越靖・鈴川和己・向井陽美・長谷川雄一・小島 寛・長澤俊郎
• 通讯作者: 小原直・大越靖・鈴川和己・向井陽美・長谷川雄一・小島 寛・長澤俊郎

腎臓におけるエリスロポエチン遺伝子発現制御機構の解析

肾脏促红细胞生成素基因表达调控机制分析

• 发表时间: 2007
• 作者: Katsura Y;Suzukawa K;Nanmoku T;Nemoto N;Machino T;Obara N;Okoshi Y;Mukai HY;Hasegawa Y;Kojima H;Nagasawa T.;佐藤智咲・鈴木教郎・小原直・山嵜瞬・潘小青・今川重彦・山本雅之
• 通讯作者: 佐藤智咲・鈴木教郎・小原直・山嵜瞬・潘小青・今川重彦・山本雅之

Repression via the GATA bos is essential for tissue-specific erythropoietin geneexpression.

通过 GATA bos 的抑制对于组织特异性促红细胞生成素基因表达至关重要。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Blood (In press)
• 作者: Obara N;Suzuki N;Kim K;Imagawa S;Nagasawa T;Yamamoto M.
• 通讯作者: Yamamoto M.