New therapeutic strategy for Bullous congenital ichthyosiformerythroderma by gene silencing

基因沉默治疗大疱性先天性鱼鳞病样红皮病的新策略

• 批准号: 19591293
• 负责人: ABE Yukiko
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19591293/
• 关键词: 皮膚病理学; 遺伝子治療; RNAi; 角化症

水疱型先天性魚鱗癬様紅皮症(Bullous congenital ichthyosiform erythroderma : BCIE)は、表皮細胞に発現するケラチン1または10の遺伝子変異のdominant-negative effectにより発症する、重症型の常染色体優性遺伝性角化症である。遺伝子変異の同定により、出生前診断が可能となったがまだ根本的な治療についての研究は進んでいない。一方、RNA interference(RNAi)は、21~23塩基の二本鎖RNAからなるsmall interfering RNA (siRNA)を細胞に導入すると、相同配列を持つmRNAを破壊することで特定の蛋白質合成のみを特異的に抑制するものである。導入するsiRNAはごく少量でも目的蛋白を劇的に抑制でき、その反応は非常に特異的であることから、遺伝子治療として臨床応用されることが期待されている。本研究では、BCIEをモデルとして、RNAiによる遺伝性皮膚疾患の遺伝子治療を試みた。理論上、異常なケラチン10をRNAiによりmRNAレベルで特異的に発現抑制(ノックダウン)すると、正常なケラチン10を発現するmRNAのみが残り、臨床症状が改善する。本研究では、変異が同定されているBCIE患者においてケラチン10の異常部位を含む配列でsiRNAを設計することにより異常蛋白の発現を特異的に抑制しようと試みた。その結果、正常なケラチン10においては、siRNA導入によりmRNAレベルで発現が抑制されることをrealtime PCRで確認することができ、持続的な抑制によりケラチン10の発現が十分抑えられると考えたが、経時的に観察したところ、重要な細胞骨格を形成するケラチン10を持続的に抑制することにより、細胞が死滅してしまうことが観察された。次に、異常なケラチン10の生成のみを特異的に抑えるため、BCIE患者の変異部位を認識するように複数のsiRNAを設計し導入を行ったが、mRNAレベルで効果的に発現抑制は確認されていない。

大疱性先天性鱼鳞病样红皮病 (BCIE) 是常染色体显性红皮病的一种严重形式，由表皮细胞表达的角蛋白 1 或 10 基因突变的显性失活效应引起。基因突变的识别使产前诊断成为可能，但基础治疗的研究尚未取得进展。另一方面，RNA干扰（RNAi）是通过将小干扰RNA（siRNA）（一种21至23个碱基的双链RNA）引入细胞中，破坏具有同源序列的mRNA，从而特异性控制它的目的是抑制特定的蛋白质。即使引入少量的siRNA，也能显着抑制靶蛋白，且反应非常特异，因此有望在临床上用作基因治疗。在这项研究中，我们以 BCIE 为模型，尝试使用 RNAi 来治疗遗传性皮肤病。理论上，如果通过RNAi在mRNA水平上特异性抑制（敲低）异常角蛋白10的表达，则仅表达正常角蛋白10的mRNA将保留，并且临床症状将得到改善。在本研究中，我们尝试通过设计含有角蛋白10异常位点的序列的siRNA来特异性抑制已发现突变的BCIE患者中异常蛋白的表达。结果，我们能够通过实时PCR确认，通过引入siRNA，正常角蛋白10的表达在mRNA水平受到抑制，并且我们认为持续的抑制足以抑制角蛋白10的表达。当随着时间的推移观察时，据观察，细胞因角蛋白 10 的持续抑制而死亡，角蛋白 10 形成重要的细胞骨架。接下来，为了特异性抑制异常角蛋白10的产生，我们设计并引入了多种识别BCIE患者突变位点的siRNA，但在mRNA水平上的表达抑制尚未得到证实。

项目成果

A Severe and Refractory Case of Anti-p200 Pemphigoid Resulting in Multiple Skin Ulcers and Scar Formation

• DOI: 10.1159/000182268
• 发表时间: 2009-01-01
• 期刊: DERMATOLOGY
• 影响因子: 3.4
• 作者: Goto-Ohguchi, Y.;Nishie, W.;Shimizu, H.
• 通讯作者: Shimizu, H.

Novel ABCA12 mutations identified in two cases of non-bullous congenital ichthyosiform erythroderma associated with multiple skin malignant neoplasia

• DOI: 10.1038/sj.jid.5700885
• 发表时间: 2007-11-01
• 期刊: JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY
• 影响因子: 6.5
• 作者: Natsuga, Ken;Akiyama, Masashi;Shimizu, Hiroshi
• 通讯作者: Shimizu, Hiroshi

Tumour-like muscular sarcoidosis

肿瘤样肌肉结节病

• 发表时间: 2007
• 期刊: Clin Exp Dermatol 32
• 作者: Nemoto I;Shimizu T;Fujita Y;Tateishi Y;Tsuji-Abe Y;Shimizu H
• 通讯作者: Shimizu H

Acquired perforating dermatosis appearing as elastosis perforans serpiginosa and perforating folliculitis

获得性穿孔性皮肤病，表现为穿孔性弹力纤维变性和穿孔性毛囊炎

• 发表时间: 2008
• 期刊: Clin Exp Dermatol 33
• 作者: Abe R;Murase S;Nomura Y;Natsuga K;Tateishi Y;Tomita Y;Tsuji-Abe Y;Matsumura T;Shimizu H
• 通讯作者: Shimizu H

Tumour-like muscular sarcoidosis.

肿瘤样肌肉结节病。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Clin Exp Dermatol 32
• 作者: Natsuga K;Akiyama M;Kato N;Sakai K;Sugiyama-Nakagiri Y;Nishimura M;Hata H;Abe M;Arita K;Tsuji-Abe Y;Onozuka T;Aoyagi S;Kodama K;Ujiie H;Tomita Y;Shimizu H;Natsuga K;Nemoto I
• 通讯作者: Nemoto I