ラット後根神経節ニューロンにおけるTTX非感受性ナトリウムチャネルの機能解析

大鼠背根神经节TTX不敏感钠通道的功能分析

基本信息

批准号：
08670054
负责人：
緒方宣邦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ラット後根神経節より単離した神経細胞において、outside-out型膜電位固定法を用い、電位依存性ナトリウムチャネルの性質を調べたところ単位単一電流値(unit amplitude)の違いにより2つのタイプの単一電流が固定された。このどちらの単一電流も細胞膜外側のナトリウムイオンをテトラメチルアンモニウムイオンで置換した溶液では記録されなかった。また、2種類の単一電流はテトロドトキシンに対する感受性が異なっていた。すなわち、振幅の大きい方の電流は1mMのテトロドトキシンにて抑制されるのに対して(これを以下TTX-Sと略す)、小さい方の電流は1mMのテトロドトキシンでも影響を受けなかった(以下TTX-Iと略す)。細胞内ナトリウム濃度1.4mM、細胞外ナトリウム濃度250mMにおいて、-40mVに脱分極させたときの単一電流幅測定値はTTX-Sが1.16pA、TTX-Iが0.57pAであった。各々の電流のコンダクタンスを-30mVにおける傾斜により求めるとTTX-Sは16.3pS、TTX-Iは8.5pSであった。これら2種類の電流の活性化、不活性化レベルには差異がみられた。つまりTTX-Sは-60mV以上の脱分極パルスで活性化されるが、TTX-Iは-40mV以上で活性化された。またプレパルスにより両者の不活性化レベルを比較すると、-50mV以上のプレパルスでは、TTX-Sの方がTTX-Iより不活性化を受けやすいことが示された。単一電流記録より合成したそれぞれのアンサンブル電流は、ホールセル記録で得られた各々の電流の特徴を持っていた。これらのことから、ラット後根神経節細胞における2種類のナトリウムチャネルはテトロドトキシン感受性が異なるだけでなく、単一チャネルコンダクタンスの種類の異なる電流であることが結論された。

在从大鼠背根神经节分离的神经元中，我们使用外向膜电压钳法研究了电压门控钠通道的特性，发现由于单位振幅的差异，有两种类型的单一电流被固定。在细胞膜外的钠离子被四甲基铵离子取代的溶液中，没有记录到这些单一电流。此外，两种类型的单电流对河豚毒素的敏感性不同。换言之，较大振幅的电流被1mM河豚毒素(以下简称TTX-S)抑制，而较小的电流即使受到1mM河豚毒素(以下简称TTX-S)(简称I)也没有影响。。在细胞内钠浓度为 1.4mM 和细胞外钠浓度为 250mM 时，去极化至 -40mV 时的单电流宽度测量值对于 TTX-S 为 1.16pA，对于 TTX-I 为 0.57pA。当每个电流的电导由-30mV处的斜率确定时，TTX-S为16.3 pS，TTX-I为8.5 pS。观察到这两种电流的激活和失活水平存在差异。换句话说，TTX-S由-60 mV或更高的去极化脉冲激活，而TTX-I由-40 mV或更高的去极化脉冲激活。此外，当使用预脉冲比较两者的失活水平时，表明在-50 mV或更高的预脉冲下，TTX-S比TTX-I更容易失活。从单个电流记录合成的每个整体电流具有从全细胞记录获得的每个电流的特征。从这些结果可以看出，大鼠背根神经节细胞中的两种钠通道不仅具有不同的河豚毒素敏感性，而且具有不同类型的单通道电导电流。