未熟B細胞に由来するリンパ芽球性白血病・リンパ腫に特異的なマーカーのクローニング

未成熟 B 细胞衍生的淋巴细胞白血病/淋巴瘤特异性标记物的克隆

• 批准号: 07770131
• 负责人: 中村 直哉
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770131/
• 关键词: 遺伝子クローニング; 単クローン抗体; precursor B

precursor B細胞に由来する白血病、リンパ腫に特異性を示すマウス単クローン抗体WH2及びWH14の反応性についてさらに検討を加えた。1.WH2の特性:1)正常人末梢血液単核球との反応性を二重染色法を用いてFlowcytometryにて検討(n=4)した。CD20陽性B細胞及びCD3陽性T細胞のいずれにも約50%にWH2陽性細胞を認めた。また、リンパ腫に対してはB細胞性リンパ腫では21例中17例、T細胞性リンパ腫では7例中4例にそれぞれ陽性を示した。すなわち、WH2は未熟なB、T細胞の他、成熟したB、T細胞の一部にも反応を示し、未熟なリンパ球から成熟したリンパ球にかけて発現する分化抗原を認識していることが示唆された。2)HBL-3(precursor B細胞由来,hybridoma作製時にimmunogenとして用いている),Molt3(T cell由来),U937(単球由来)に対してWH2のmodulationを検討した。抗原抗体複合物のcapping及びinternalizationはHBL-3のみにみられ、他2種の細胞株では認められなかった。2.WH14の特性:precursor B細胞に由来する白血病、リンパ腫に比較的特異性に反応するWH14が、Hodgkin病におけるReed-Sternberg(RS)細胞と反応することはRS細胞の組織由来を考える上で非常に興味ある所見と考えられる。3.WH2,WH14の認識する抗原の遺伝子クローニング:lymphoblast cell lineから得られたcDNA libraryから、WH2、WH14が認識する抗原をcodeする遺伝子配列をクローニングするため、マウス腹腔内で濃縮されたWH2、WH14抗体を用いてimmunoscreeningを行っている。しかし、現在のところ、陽性クローンは得られていない。

我们进一步研究了小鼠单克隆抗体 WH2 和 WH14 的反应性，它们对源自前体 B 细胞的白血病和淋巴瘤具有特异性。 1. WH2的特征： 1)使用流式细胞术使用双重染色法研究与正常人外周血单核细胞的反应性(n=4)。大约 50% 的 CD20 阳性 B 细胞和 CD3 阳性 T 细胞中发现了 WH2 阳性细胞。关于淋巴瘤，21 例 B 细胞淋巴瘤中有 17 例呈阳性，7 例 T 细胞淋巴瘤中有 4 例呈阳性。换句话说，WH2不仅与未成熟的B细胞和T细胞发生反应，而且还与一些成熟的B细胞和T细胞发生反应，这表明它能够识别从未成熟淋巴细胞向成熟淋巴细胞表达的分化抗原。 2) 研究了 HBL-3（源自前体 B 细胞，在杂交瘤生产过程中用作免疫原）、Molt3（源自 T 细胞）和 U937（源自单核细胞）对 WH2 的调节。仅在 HBL-3 中观察到抗原抗体复合物的加帽和内化，而在其他两种细胞系中未观察到。 2.WH14的特性：WH14对源自前体B细胞的白血病和淋巴瘤具有相对特异性的反应，与霍奇金病中的里德-斯滕伯格(RS)细胞发生反应，这在考虑RS细胞的组织起源时很重要。被认为是一个非常有趣的发现。 3. WH2和WH14识别的抗原的基因克隆：为了从小鼠腹膜腔中集中的淋巴母细胞系WH2获得的cDNA文库中克隆编码WH2和WH14识别的抗原的基因序列，我们使用WH14抗体。但目前尚未获得阳性克隆。