高等植物における光合成エネルギー生産の質的制御機構の解明

阐明高等植物光合能量产生的定性控制机制

基本信息

批准号：
07J04517
负责人：
高林厚史
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J04517/
关键词：
光合成バイオインフォマティクスタンパク質複合体

项目摘要

前年度までに見出した新規NDHサブユニット候補であるNDF1,NDF2,NDF4,NDF5,NDF6に関して、詳細な生化学的な解析を行った。まず、ndhM,nahO変異株におけるそれらNDFタンパク質群の蓄積量は野生株と同等であったが、NdhBタンパク質が蓄積しないcrr2-2株においては、NDFタンパク質群が蓄積していなかった。次に、タバコndhB欠損株,ndhJ/ndhK二重欠損株,ndhC/ndhJ/ndhK三重欠損株におけるNDFタンパク質群の蓄積量を検証したところ、ndhJ/ndhK二重欠損株においては野生株と同等の蓄積量を示し、ndhB欠損株およびndhC/ndhJ/ndhK三重欠損株においては蓄積量が顕著に減少していた。さらに、変異株から抽出したチラコイド膜を用いて、BN-PAGEで分離した後でウエスタン解析を行ったところ、疎水性サブユニットの欠損株であるcrr2-2株ではNDH複合体が検出されなかったが、その一方で親水性サブユニットの欠損株であるndhM株およびndhO株では、サイズが減少したNDH複合体が検出された。この結果は「NDH複合体の疎水性サブユニット群(NdhA-NdhG)の欠損株と親水性サブユニット群(NdhH-NdhO)の欠損株でNDH複合体の存在状態が異なる」ことを示しており、NDH複合体のassemblyやstabilityについて考える上で、重要な知見である。これまでの結果は「NDFタンパク質群が新規なNDHサブユニットである」ことを強く支持するものであり、鉄硫黄クラスターを有するNDF4はNDHの電子供与体認識に関与する可能性が高いことから、NDHのサブユニット構成に関する研究目的は、ほぼ達成できた。

对NDF1，NDF2，NDF4，NDF5，NDF6进行了详细的生化分析，该分析在上一年发现的新NDH亚基中发现。首先，NDF蛋白基团在NDHM和NAHO突变组中的积累与野生菌株相同，但是在NDHB蛋白未积累的CRR2-2库存中，NDF蛋白没有积累。接下来，当NDF蛋白质基团在烟草NDHB默认股票中的积累，NDHJ/NDHK双缺陷，NDHC/NDHJ/NDHK三重缺陷共享，NDHJ/NDHJ/NDHK双重损失相同。 NDHB缺陷和NDHC/NDHJ/NDHK三重缺陷股份的积累显着下降。此外，当使用从突变体中提取的氟烷类膜分离后进行西方分析时，在CRR2-2股票中未检测到NDH复合物，这是疏水亚基赤字。检测到NDHM和NDHO股份，这些股份是亲水亚单位不足的。结果表明，“ NDH复合物在NDH复合物中的水力（NDHH-NDHO）缺陷（NDHH-NDHO）缺陷方面有所不同。和NDH复合物的稳定性。到目前为止，结果由“ NDF蛋白质组为新的NDH亚基”得到强烈支持，而具有铁硫簇的NDF4可能与NDH的电子捐赠识别有关。