神経細胞接着因子と依存との関連に基づく依存症治療薬確立への応用

基于神经细胞粘附因子与成瘾关系在药物成瘾治疗中的应用

基本信息

批准号：
18790823
负责人：
石黒浩毅
金额：
$ 2.24万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は神経細胞接着因子NrCAM低発現が依存易形成性にnegativeに働くというヒト死後脳や遺伝子改変マウスの先行研究成果を発展させたものであり、依存形成の阻害に働く分子ネットの一部を明らかにすることにより病態解明と治療法の確立等に寄与することを目的とした。まずはNrCAM以外の神経i接着因子についても遣伝子多型と依存症との関連が示され、これら神経ネットワーキングに関わる分子が依存形成に重要な役割を果たすことがわかった。さらに、ニューロン由来およびグリア由来の培養細胞におけるNrCAM遺伝子に対してsiRNAを用いて発現抑制を行うこと、ならびにNrcamノックアウトマウスの脳の遺伝子発現解析を行うことにより、NrCAMが影響を与える分子群の遺伝子発現を網羅的に検討した。ヒト死後脳を用いたNrCAM遺伝子多型が及ぼす遺伝子発現変化の割合は約50%であると定量できたので、50%程度の遺伝子発現抑制効果を得たsiRNA実験系組織ならびにheterozygoteノックアウトマウス脳を解析した。それぞれの組織に対するイルミナビーズァレイ解析装置による網羅的遺伝子発現解析では、主にグルタミン酸系やGABA系、その他の神経系の分子をコードする遺伝子の発現変化が認められた。その内、培養細胞系およびノックアウトマウス脳において共に遺伝子発現変化が確認されたグルタミン酸系酵素分子は、その阻害剤がモルヒネをはじめとする依存性薬物への形成阻害を起こすことから、治療薬としての可能性を示唆するもめと考えられた。

这项研究扩展了先前在死后人类大脑和转基因小鼠中的研究结果，表明神经元细胞粘附因子 NrCAM 的低表达对形成依赖性的倾向具有负面影响，并且它是一个分子网络的一部分，该网络致力于抑制依赖性的形成，目的是通过阐明这一点来促进病理学的阐明和治疗方法的建立。首先，论证了NrCAM以外的神经元粘附因子的基因多态性与成瘾之间的关系，发现这些参与神经网络的分子在成瘾的形成中发挥着重要作用。此外，通过使用siRNA抑制来自神经元和神经胶质细胞的培养细胞中NrCAM基因的表达，并通过分析Nrcam敲除小鼠大脑中的基因表达，我们确定了受NrCAM影响的分子组的基因。表达进行了全面检查。由于我们能够使用死后人脑来量化由NrCAM基因多态性引起的基因表达变化率约为50%，因此我们使用了基因表达抑制效果约为50%的siRNA实验组织和杂合子敲除小鼠脑。 % 已分析。使用 Illumina 珠阵列分析仪对每个组织进行全面的基因表达分析，揭示了编码谷氨酸系统、GABA 系统和其他神经系统分子的基因表达的变化。其中，谷氨酸酶分子的基因表达变化已在培养细胞系和敲除小鼠大脑中得到证实，被认为可用作治疗剂，因为它们的抑制剂可抑制吗啡等成瘾药物的形成。这是一场暗示可能性的争论。