レトロウイルスのインテグレーションに関与する宿主因子の解析

逆转录病毒整合涉及的宿主因素分析

• 批准号: 18790326
• 负责人: 有海 康雄
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790326/
• 关键词: レトロウイルス; インテグレーション; RNAウイルス; C型肝炎ウイルス; DDX3RNAヘリカーゼ; HIV-1; 宿主因子; クロマチン; ゲノム; Tat; INI1; 転写制御

これまでヒト免疫不全ウイルス(HIV-1)のインテクレーションに必要なインテクラーゼに,結合する宿主因子INIIは、HIV-1の感染初期過程には影響及ぼさないものの、HIV-1Tatに結合し、HIV-1の転写制御を増強することを見いだしてきた(Ariumi, et.al.Retrovirology3:47,2006)。また、HIV-1のインテグレーションに関与が示唆されているATMが新たにHIV-1 mRNAの核外輸送に関与しているHIV-1Revの活性を制御していることも明らかにしてきた(Ariumi and Trono,J.Viro1.80: 2445-2452,2006)。最近、DDX3 DEAD-box RNAヘリカーゼがRevの機能制御に重要な宿主因子であるという報告がなされた。そこで、今年度は同じRNAウイルスであり、HIV-1同様、ヒトに持続感染するC型肝炎ウイルス(HCV)め複製に対してもAT域やDDX3が関与するのか検討してみた。その結果、DNA damage sensorであるATMがHCV RNA複製に必要な宿王因子であることを見いだした。またATMキナーゼ阻害剤を作用させるとHCVのRNA複製が抑制された。(Ariumi, et. al. 論文投稿中)。一方、DDX3をshRNAを発現するレトロウイルスベクターを用いてノックダウンさせるとHC VRNA複製とJFH1株を用いたHCV感染が顕著に抑制された。さらにHCV CoreとDDX3が相互作用することを免疫沈降実験や共焦点レーザー顕微鏡を用いた細胞内局在の観察により確認し(Ariumi, et. Al.J.Viro1.81:13922-13926,2007)。これらの結果より、HIV-1とHCVの両者の複製に必要な宿主因子であるATMとDDX3に対する阻害剤は、AIDSとC型肝炎の両方の慢性持続ウイルス感染症に対する有効な抗ウイルス剤として期待された。

迄今为止，与人类免疫缺陷病毒（HIV-1）整合所必需的 intecrase 结合的宿主因子 INII 对 HIV-1 感染的初始过程没有影响，但它与 HIV-1 Tat 结合并具有已被发现增强 1 的转录调控（Ariumi 等人，Retrovirology 3:47, 2006）。我们还发现，ATM（被认为参与 HIV-1 整合）控制 HIV-1Rev 的活性，而 HIV-1Rev 参与 HIV-1 mRNA 的核输出（Ariumi 和 Trono，J.Viro1.80： 2445-2452，2006）。最近有报道称DDX3 DEAD-box RNA解旋酶是调节Rev功能的重要宿主因子。因此，今年，我们研究了AT区域和DDX3是否也参与丙型肝炎病毒（HCV）的复制，丙型肝炎病毒是一种RNA病毒，与HIV-1一样持续感染人类。结果，我们发现ATM（一种DNA损伤传感器）是HCV RNA复制所需的宿主因子。此外，ATM激酶抑制剂的作用抑制了HCV RNA复制。 （Ariumi 等人提交的论文）。另一方面，当使用表达shRNA的逆转录病毒载体敲低DDX3时，使用JFH1株的HC VRNA复制和HCV感染被显着抑制。此外，通过免疫沉淀实验和使用共焦激光显微镜观察细胞内定位证实了HCV Core和DDX3之间的相互作用(Ariumi，et.Al.J.Viro1.81：13922-13926，2007)。这些结果表明，ATM和DDX3（HIV-1和HCV复制所需的宿主因子）的抑制剂有望成为对抗艾滋病和丙型肝炎等慢性持续性病毒感染的有效抗病毒药物。

项目成果

Serum-free cell culture system supplemented with lipid-rich albumin for hepatitis Cvirus (strain 0 of genotype 1b) replication.

添加富含脂质白蛋白的无血清细胞培养系统，用于丙型肝炎病毒（基因型 1b 0 株）的复制。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Virus Research 125
• 作者: Begum;M.D.;Umemura.M.;Kon;S.;Yahagi;A.;Hamada;S.;Oshiro;K.;Gotoh;K.;Nishizono;A.;Uede;T.;Matsuzaki;G.;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;矢作 綾野;梅村 正幸;岡本 祐子;矢作 綾野;小濱 秀泰;小濱 秀泰;梅村 正幸;Ken-ichi Abe
• 通讯作者: Ken-ichi Abe

DNA damahe sensors ATM and Chk2 are required for HCV RNA replication

HCV RNA 复制需要 DNA damahe 传感器 ATM 和 Chk2

• 发表时间: 2007
• 作者: Begum;M.D.;Umemura.M.;Kon;S.;Yahagi;A.;Hamada;S.;Oshiro;K.;Gotoh;K.;Nishizono;A.;Uede;T.;Matsuzaki;G.;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;矢作 綾野;梅村 正幸;岡本 祐子;矢作 綾野;小濱 秀泰;小濱 秀泰;梅村 正幸;Ken-ichi Abe;Ken-ichi Abe;Yasuo Ariumi;Yasuo Ariumi
• 通讯作者: Yasuo Ariumi

Serum-free cell culture system supplemented with lipid-rich albumin for hepatitis C virus (strain 0 of genotype 1b) replication

添加富脂白蛋白的无血清细胞培养系统用于丙型肝炎病毒（基因型 1b 0 株）复制

• 发表时间: 2007
• 期刊: Virus Research (印刷中)
• 作者: Begum;M.D.;Umemura.M.;Kon;S.;Yahagi;A.;Hamada;S.;Oshiro;K.;Gotoh;K.;Nishizono;A.;Uede;T.;Matsuzaki;G.;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;矢作 綾野;梅村 正幸;岡本 祐子;矢作 綾野;小濱 秀泰;小濱 秀泰;梅村 正幸;Ken-ichi Abe;Ken-ichi Abe
• 通讯作者: Ken-ichi Abe