レトロウイルスのインテグレーションに関与する宿主因子の解析

逆转录病毒整合涉及的宿主因素分析

• 批准号: 18790326
• 负责人: 有海 康雄
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790326/
• 关键词: レトロウイルス; インテグレーション; RNAウイルス; C型肝炎ウイルス; DDX3RNAヘリカーゼ; HIV-1; 宿主因子; クロマチン; ゲノム; Tat; INI1; 転写制御

これまでヒト免疫不全ウイルス(HIV-1)のインテクレーションに必要なインテクラーゼに,結合する宿主因子INIIは、HIV-1の感染初期過程には影響及ぼさないものの、HIV-1Tatに結合し、HIV-1の転写制御を増強することを見いだしてきた(Ariumi, et.al.Retrovirology3:47,2006)。また、HIV-1のインテグレーションに関与が示唆されているATMが新たにHIV-1 mRNAの核外輸送に関与しているHIV-1Revの活性を制御していることも明らかにしてきた(Ariumi and Trono,J.Viro1.80: 2445-2452,2006)。最近、DDX3 DEAD-box RNAヘリカーゼがRevの機能制御に重要な宿主因子であるという報告がなされた。そこで、今年度は同じRNAウイルスであり、HIV-1同様、ヒトに持続感染するC型肝炎ウイルス(HCV)め複製に対してもAT域やDDX3が関与するのか検討してみた。その結果、DNA damage sensorであるATMがHCV RNA複製に必要な宿王因子であることを見いだした。またATMキナーゼ阻害剤を作用させるとHCVのRNA複製が抑制された。(Ariumi, et. al. 論文投稿中)。一方、DDX3をshRNAを発現するレトロウイルスベクターを用いてノックダウンさせるとHC VRNA複製とJFH1株を用いたHCV感染が顕著に抑制された。さらにHCV CoreとDDX3が相互作用することを免疫沈降実験や共焦点レーザー顕微鏡を用いた細胞内局在の観察により確認し(Ariumi, et. Al.J.Viro1.81:13922-13926,2007)。これらの結果より、HIV-1とHCVの両者の複製に必要な宿主因子であるATMとDDX3に対する阻害剤は、AIDSとC型肝炎の両方の慢性持続ウイルス感染症に対する有効な抗ウイルス剤として期待された。

以前，已发现与整合人免疫缺陷病毒（HIV-1）所需的inii宿主因子INII结合，与HIV-1TAT结合并增强了HIV-1的转录调节（Ariumi等，Retrovirology 3:47，2006）。还已经表明，已建议与HIV-1整合有关的ATM调节HIV-1REV的活性，HIV-1REV的活性新与HIV-1 mRNA的核转运（Ariumi和Trono，J。Viro1.80：2445-2452，2006）。最近，据报道，DDX3死箱RNA解旋酶是对Rev的功能调节的重要宿主因素。因此，今年，我们研究了AT区域和DDX3是否参与了乙型肝炎病毒（HCV）的复制，这是同一RNA病毒，就像HIV-1一样，像HIV-1一样，感染了Humans promist promistations anumans promistications anumans promistications promistications。结果，我们发现DNA损伤传感器ATM是HCV RNA复制的必要因素。此外，ATM激酶抑制剂的作用抑制了HCV RNA复制。 （Ariumi等。当前提交论文）。另一方面，使用表达shRNA的逆转录病毒载体击倒DDX3，可以通过JFH1菌株显着抑制HC VRNA复制和HCV感染。此外，通过使用共聚焦激光显微镜观察免疫沉淀实验并观察亚细胞定位（Aliumi，et。Al.j.viro1.81：139222-13926，2007），可以证实HCV核与DDX3之间的相互作用。基于这些结果，ATM和DDX3的抑制剂（HIV-1和HCV复制所需的宿主因子都将是有效的抗病毒剂，以抗病毒剂，以抗病艾滋病和肝炎的慢性持续病毒感染。

项目成果

Serum-free cell culture system supplemented with lipid-rich albumin for hepatitis Cvirus (strain 0 of genotype 1b) replication.

添加富含脂质白蛋白的无血清细胞培养系统，用于丙型肝炎病毒（基因型 1b 0 株）的复制。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Virus Research 125
• 作者: Begum;M.D.;Umemura.M.;Kon;S.;Yahagi;A.;Hamada;S.;Oshiro;K.;Gotoh;K.;Nishizono;A.;Uede;T.;Matsuzaki;G.;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;矢作 綾野;梅村 正幸;岡本 祐子;矢作 綾野;小濱 秀泰;小濱 秀泰;梅村 正幸;Ken-ichi Abe
• 通讯作者: Ken-ichi Abe

DNA damahe sensors ATM and Chk2 are required for HCV RNA replication

HCV RNA 复制需要 DNA damahe 传感器 ATM 和 Chk2

• 发表时间: 2007
• 作者: Begum;M.D.;Umemura.M.;Kon;S.;Yahagi;A.;Hamada;S.;Oshiro;K.;Gotoh;K.;Nishizono;A.;Uede;T.;Matsuzaki;G.;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;矢作 綾野;梅村 正幸;岡本 祐子;矢作 綾野;小濱 秀泰;小濱 秀泰;梅村 正幸;Ken-ichi Abe;Ken-ichi Abe;Yasuo Ariumi;Yasuo Ariumi
• 通讯作者: Yasuo Ariumi

Serum-free cell culture system supplemented with lipid-rich albumin for hepatitis C virus (strain 0 of genotype 1b) replication

添加富脂白蛋白的无血清细胞培养系统用于丙型肝炎病毒（基因型 1b 0 株）复制

• 发表时间: 2007
• 期刊: Virus Research (印刷中)
• 作者: Begum;M.D.;Umemura.M.;Kon;S.;Yahagi;A.;Hamada;S.;Oshiro;K.;Gotoh;K.;Nishizono;A.;Uede;T.;Matsuzaki;G.;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;梅村 正幸;矢作 綾野;梅村 正幸;岡本 祐子;矢作 綾野;小濱 秀泰;小濱 秀泰;梅村 正幸;Ken-ichi Abe;Ken-ichi Abe
• 通讯作者: Ken-ichi Abe