下垂体前葉のレチノイン酸合成酵素の同定と新たな細胞機能調節メカニズムの解明

垂体前叶视黄酸合酶的鉴定及新细胞功能调节机制的阐明

• 批准号: 18790149
• 负责人: 藤原 研
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790149/
• 关键词: 下垂体前葉; レチノイン酸; レチノアルデヒド脱水素酵素; 細胞間相互作用; 器官形成

本年度は成体ラット下垂体前葉におけるレチノアルデヒド脱水素酵素1(RALDH1)の発現を詳細に検討した。1.昨年度はRALDH1のmRNAをin situ hybridization法により同定することに成功したのでタンパク質レベルでの検出を試みた。ラットRALDH1タンパク質の特異的アミノ酸配列からペプチドを合成し、抗体を作製した。下垂体前葉においてmRNA発現細胞と一致する免疫陽性反応を示すRALIDH1特異的抗体を得ることができた。抗RALDH1抗体と各種下垂体ホルモン抗体との免疫二重染色を行ったところプロラクチン細胞と濾胞星状細胞で産生していることが分かった。2.下垂体でのRALDH1発現は雌雄差があることを見出した。RALDHl mRNA発現量はリアルタイムPCR法を用いた定量的解析、in situ hybridization法と免疫組織化学を用いた定性的解析のどちらにおいても雄に比べ雌では有意に低く、雌の性周期では発情期に最も低いことが明らかとなった。3.RALDH1の発現はエストロゲンにより抑制されることを明らかにした。雌において卵巣摘出を施すと下垂体でのRALDH1発現は増加し、17βエストラジオールを投与すると著しく減弱することが分かった。さらにエストロゲンの効果は濃度依存的であり、投与後1時間で抑制作用が確認された。以上のことから、成体ラット下垂体前葉ではRALDH1により局所的にレチノイン酸が合成されパラクライン、オートクライン的に細胞機能を調節する可能性が示された。さらに、性ホルモンがRALDH1発現量を変化させることで局所的レチノイン酸合成を調節する因子の一つとして働く可能性が示された。

今年，我们详细研究了成年大鼠前垂体前垂体中视网膜醛脱氢酶1（RALDH1）的表达。 1。去年，我们成功地使用原位杂交鉴定了RALDH1 mRNA，因此我们试图在蛋白质水平上检测到它。从大鼠RaldH1蛋白的特定氨基酸序列合成肽以产生抗体。获得了一种与垂体前腺中表达mRNA的细胞一致的免疫反应的Ralidh1特异性抗体。免疫双重染色是用抗rraldh1抗体和各种垂体激素抗体进行的，并被发现由催乳素细胞和卵泡星形胶质细胞产生。 2。我们发现垂体中的RALDH1表达在男性和女性中有所不同。在使用实时PCR的两种定量分析中，使用免疫组织化学的原位杂交和定性分析，发现女性的Raldhl mRNA的表达水平明显低于男性，并且在雌性期间，女性性周期的表达水平最低。 3。揭示了raldh1的表达被雌激素抑制。发现在女性中进行卵巢切除术时，垂体中的RALDH1表达会增加，当施用17β雌二醇时，肌肉切除术会显着降低。此外，雌激素的作用取决于浓度，并且在给药后1小时确认抑制作用。从上面看，已经表明，在成年大鼠的垂体前垂体中由raldh1局部合成的视黄酸可以调节旁分泌和自分泌中的细胞功能。此外，已经表明，性激素可以通过改变RALDH1表达水平来调节局部视黄酸合成的因素之一。

项目成果

Study on overexpression of retinaldehyde dehydrogenases (RALDHs) in the rat anterior pituitary cells

大鼠垂体前叶细胞视黄醛脱氢酶（RALDHs）过表达的研究

• 发表时间: 2008
• 作者: Bulgan Davaadash;藤原 研;楠本憲司;瀧上 周;屋代 隆
• 通讯作者: 屋代 隆

下垂体前葉における新たなパラクライン調節機構-成体ラット下垂体前葉でのレチノイン酸合成の存在-

垂体前叶新的旁分泌调节机制-成年大鼠垂体前叶存在视黄酸合成-

• 发表时间: 2007
• 作者: Fujiwara K;Davaadash B;Kikuchi M;Takigami S;Yashiro T.;瀧上 周;藤原 研;藤原研;菊地元史;藤原研;藤原 研;菊地 元史;藤原 研;菊地元史;藤原研;堀口幸太郎;菊地元史;藤原研;堀口幸太郎;藤原研;堀口幸太郎;藤原研;堀口幸太郎;堀口幸太郎;藤原研;藤原研;菊地元史;堀口幸太郎;菊地元史;堀口幸太郎;屋代隆;屋代隆;藤原研;堀口幸太郎;藤原 研;Davaadash Bulgan;堀口幸太郎;楠本 憲司;藤原研;藤原研
• 通讯作者: 藤原研

エストロゲンはラット下垂体前葉でのretinaldehyde dehydrogenase 1 (RALDH1)の発現を抑制する

雌激素抑制大鼠垂体前叶视黄醛脱氢酶 1 (RALDH1) 的表达。

• 发表时间: 2008
• 作者: 藤原 研;Bulgan Davaadash;菊地元史;屋代 隆
• 通讯作者: 屋代 隆

正常下垂体前葉細胞とプロラクチン産生腫瘍におけるレチノイン酸合成酵素の発現

视黄酸合酶在正常垂体前叶细胞和泌乳素肿瘤中的表达

• 发表时间: 2007
• 作者: Fujiwara K;Davaadash B;Kikuchi M;Takigami S;Yashiro T.;瀧上 周;藤原 研;藤原研;菊地元史;藤原研;藤原 研;菊地 元史;藤原 研;菊地元史;藤原研;堀口幸太郎;菊地元史;藤原研;堀口幸太郎;藤原研;堀口幸太郎;藤原研;堀口幸太郎;堀口幸太郎;藤原研;藤原研;菊地元史;堀口幸太郎;菊地元史;堀口幸太郎;屋代隆;屋代隆;藤原研;堀口幸太郎;藤原 研;Davaadash Bulgan;堀口幸太郎;楠本 憲司;藤原研
• 通讯作者: 藤原研

成体ラット下垂体前葉細胞におけるレチノイン酸合成酵素の発現

成年大鼠垂体前叶细胞视黄酸合酶的表达

• 发表时间: 2007
• 作者: Fujiwara K;Davaadash B;Kikuchi M;Takigami S;Yashiro T.;瀧上 周;藤原 研;藤原研;菊地元史;藤原研;藤原 研;菊地 元史;藤原 研;菊地元史;藤原研;堀口幸太郎;菊地元史;藤原研;堀口幸太郎;藤原研;堀口幸太郎;藤原研;堀口幸太郎;堀口幸太郎;藤原研;藤原研;菊地元史;堀口幸太郎;菊地元史;堀口幸太郎;屋代隆;屋代隆;藤原研;堀口幸太郎;藤原 研;Davaadash Bulgan;堀口幸太郎;楠本 憲司;藤原研;藤原研;堀口幸太郎;藤原研
• 通讯作者: 藤原研