自然免疫と獲得免疫をリンクする新規アダプター分子STAP-2の機能解析

连接先天免疫和获得性免疫的新型接头分子 STAP-2 的功能分析

基本信息

批准号：
18790037
负责人：
関根勇一
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790037/
关键词：
免疫学アダプター分子 STAP-2 シグナル伝達 FAK STAT3 細胞接着 c-fms T細胞 Cbl ユビキチン化

项目摘要

STAP-2は自然免疫系・獲得免疫系シグナル間クロストークの中核を担う、非常に多機能なアダプター分子である。本年度は次の3つの研究よりその機能を明らかにした。(1)T細胞は炎症部位より産生された走化性因子により炎症局所に遊走・集積し、接着分子を介して組織へ浸潤し獲得免疫の担い手となる。この浸潤過程において、フィブロネクチン(FN)などの細胞外マトリックスとの接着が重要となる。そこで、T細胞の接着能へのSTAP-2の関与、および接着・遊走に関与するチロシンキナーゼFAKとの相互作用について解析を行った。STAP-2ノックアウトマウスにおいて脾臓由来T細胞のFNへの接着の亢進と、FAKタンパク量の増加が観察された。さらに、ヒト白血病細胞株Jurkat細胞STAP-2安定発現株において、コントロール株に比べFN接着の有意な低下と、FAKタンパク量の減少が観察された。このFAKタンパク量の減少メカニズムとして、E3リガーゼCblをSTAP-2がリクルートすることを明らかにし、STAP-2がFAKのユビキチン化・分解を促進するという新たな細胞接着抑制メカニズムを解明した。(2)STAP-2は転写因子STAT3と結合し、 IL-6サイトカインファミリーのシグナル伝達を亢進させることが報告されている。STAP-2は4箇所のリン酸化部位が同定されているがその機能は不明であった。IL-6ファミリーサイトカインLIFによりSTAP-2の250番目のチロシン残基がリン酸化されること、またそのリン酸化がSTAT3活性亢進に必要であることを明らかにした。(3)STAP-2はc-fms結合分子としてクローニングされたが、その機能的な相互作用は未解明であった。本研究において、STAP-2がマクロファージ細胞内でc-fmsと結合し、 M-CSFシグナルを抑制することでその運動能を制御していることを明らかにした。

STAP-2 是一种高度多功能的衔接分子，在先天性和后天性免疫系统信号之间的串扰中发挥着核心作用。今年，我们通过以下三项研究明确了它的功能。 (1)T细胞利用炎症部位产生的趋化因子在炎症部位迁移、积聚，通过粘附分子浸润到组织中，成为获得性免疫的载体。在此侵袭过程中，与纤连蛋白（FN）等细胞外基质的粘附很重要。因此，我们分析了STAP-2在T细胞粘附能力中的参与及其与参与粘附和迁移的酪氨酸激酶FAK的相互作用。在 STAP-2 敲除小鼠中，观察到脾源性 T 细胞对 FN 的粘附增强，FAK 蛋白水平增加。此外，在稳定表达STAP-2的人白血病细胞系Jurkat细胞中，与对照菌株相比，观察到FN粘附的显着降低和FAK蛋白量的降低。我们揭示了 STAP-2 招募 E3 连接酶 Cbl 作为 FAK 蛋白水平降低的机制，并阐明了一种新的细胞粘附抑制机制，其中 STAP-2 促进 FAK 泛素化和降解。 (2) 据报道，STAP-2 与转录因子 STAT3 结合，增强 IL-6 细胞因子家族的信号转导。已鉴定出 STAP-2 的四个磷酸化位点，但其功能尚不清楚。我们发现 STAP-2 的第 250 个酪氨酸残基被 IL-6 家族细胞因子 LIF 磷酸化，并且磷酸化是 STAT3 激活所必需的。 (3)STAP-2被克隆为c-fms结合分子，但其功能相互作用仍不清楚。在这项研究中，我们发现 STAP-2 与巨噬细胞内的 c-fms 结合，并通过抑制 M-CSF 信号来控制其运动。