マウス始原生殖細胞の分化決定システムとその制御因子群の解明

小鼠原始生殖细胞分化决定系统及其调控因子的阐明

• 批准号: 18770192
• 负责人: 岡村 大治
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770192/
• 关键词: マウス; 始原生殖細胞; 分化決定; 遺伝子スクリーニング; 機能解析; 分化

前年度、始原生殖細胞特異的に発現する遺伝子のスクリーニングの結果、発現パターンの特異性、また構造上の特製から、2つの候補遺伝子に絞った。2年計画の最終年度である今年度は、先で示した2つの候補遺伝子について、機能解析を進めた。一つの候補遺伝子は、Zn fingerモチーフを有しており、転写抑制に働く事が示されている既知の遺伝子であるが、現在までに生殖細胞での機能は全く報告されていない。当該研究領域において、生殖細胞内での体細胞特異的な遺伝子発現の抑制が注目されており、その観点からも注目される候補遺伝子である。また最近、この遺伝子がES細胞内における未分化性の維持にも必須な機能を持つ事が報告され、生殖細胞の「全能性獲得」にも機能しうる可能性が期待出来る。もう一つの候補遺伝子は、RNA bindingモチーフを有しているが、現在までにマウス始原生殖細胞において、同構造を持った分子の機能的な関与は示されておらず、始原生殖細胞分化における、新しい機能分子として注目している。両遺伝子ともに、始原生殖細胞以外での発現も認められるため、機能解析の手段としては、Cre-loxPシステムを使った、分化決定期の始原生殖細胞特異的な遺伝子欠損胚の作製によって、その機能を解析する。現在までに、当該遺伝子に対するES細胞の相同組み替え体を作製する為に、ターゲティングベクターの作製を完了、複数の相同組み替え体を同定した。現在、キメラマウスを作製する前の品質確認作業を進めている。

上一年，在原始生殖细胞中特异性表达的基因筛选表明表达模式和结构专业化的特异性仅限于两个候选基因。今年是两年计划的最后一年，我们对上面列出的两个候选基因进行了功能分析。一个候选基因具有锌指基序，是已知的基因，已显示出在转录抑制中起作用，但迄今为止，根本没有报道其在生殖细胞中的功能。在研究领域，已经注意了抑制生殖细胞中体细胞特异性基因表达的注意，从这个角度来看，它是一种吸引注意力的候选基因。最近还报道说，该基因对于维持ES细胞内的不变性至关重要，并且可以预期它也可以在生殖细胞的“戒烟”中起作用。另一个候选基因带有RNA结合基序，但迄今为止，在小鼠原始生殖细胞中尚未显示具有相同结构的分子的功能参与，并且正在集中于原始生殖细胞分化中的新功能分子。由于两个基因也在非促育生殖细胞中表达，因此通过使用Cre-loxp系统在分化阶段创建特定于原始生殖细胞的基因缺陷胚胎来分析其功能。迄今为止，为了产生相对于基因的ES细胞同源重组，靶向向量的产生已经完成，并且已经确定了多种同源重组因子。目前，在准备嵌合小鼠之前，我们正在进行质量检查。