新しい生物生産技術開発を目指した減数分裂開始機構の解明

阐明减数分裂启动机制，开发新型生物生产技术

基本信息

批准号：
07J40002
负责人：
三浦智恵美
金额：
--
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

ウナギの精子形成では、黄体ホルモン: 17α, 20β-ジヒドロキシ-4-プレグネン-3-オン(DHP)が、精原細胞に減数分裂を誘導させることが明らかになっている。本実験はDHPの刺激により、精巣での発現が変化する遺伝子のcDNAクローンのうちの精子形成関連因子(eSRS)56に関して詳細に解析し、減数分裂開始の制御機構を明らかにするとともに、得られた知見を基に未分化細胞に減数分裂を誘導する試みを行なう事により、新しい生物生産技術を目指した生体外での減数分裂誘導技術を確立することを目的として行っている。eSRS56はその塩基配列からセリンプロテアーゼの一種:トリプシンをコードしており、このトリプシンは、DHPの刺激によりそのmRNAの発現が精巣で誘導されること、その発現部位がセルトリ細胞であることなどが明らかとなっている。またトリプシンは、減数分裂の開始、精子変態の過程の一部、さらに、受精にも重要な役割を担うことが明らかとなっている。この多機能性をもつトリプシンが細胞に対し作用する際、トリプシンがセリンプロテアーゼの一種であることから、セリンプロテアーゼインヒビター(SERPIN)との相互関係のもと、プロテアーゼレセプター(PAR)を介するものと考えられる。今年度は、このウナギのSERPINとPARのcDNAクローン、精子膜上に存在するトリプシン様物質をコードするcDNAのクローニングを行った。その結果、SERPINe2、SERPINb1、PAR1、PAR2の断片が得られ、現在、完全長のcDNAクローンのクローニングを行なっている。また合わせて精子膜上に存在するトリプシン様物質をコードするcDNAのクローニングを行っているが、カドヘリン、プロスタシン様セリンプロテアーゼ、未知のセインプロテアーゼの断片が得られた。今後は、これらの得られたクローンの発現解析を行いトリプシン作用の全貌解明をめざす予定である。

在鳗鱼精子的形成中，已经揭示了孕酮：17α，20β-二羟基-4-4-pregnen-3-on（DHP）诱导了共识细胞的降低。在该实验中，详细分析了DHP的刺激，详细分析了有关精子形成因子（ESRS）56中56的cDNA克隆中的刺激，其中睾丸中表达发生了变化，控制机制变化到开始下降的控制机制。澄清并获得的降低是通过试图根据知识诱导未实现的细胞的减少来建立新生物生产技术的降低。 ESRS56是一种丝氨酸蛋白酶：一种丝氨酸蛋白酶：胰蛋白酶，该胰蛋白酶表明mRNA表达是由DHP的刺激在睾丸中诱导的，并且该位点是Certoli细胞。还揭示了胰蛋白酶在减少的开始，一部分是精子变形过程的一部分以及受精方面也起着重要作用。当这种多功能胰蛋白酶作用于细胞时，被认为是胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶，因此它将通过与塞林蛋白酶螺旋蛋白（SERPIN）相互联系的蛋白酶受体（PAR）。今年，我们在精子回忆录上进行了此EEL SERPIN，PAR cDNA克隆和克隆cDNA，以胰蛋白酶样物质。结果，已经获得了serpine2，serpinb1，par1和par2的片段，目前正在执行完整的长度cDNA克隆。同时，进行了编码精子膜上类似胰蛋白酶的物质的cDNA的克隆，但是获得了钙粘蛋白，前列腺素-sama丝氨酸蛋白酶和未知的Sain蛋白酶。将来，我们计划分析这些获得的克隆，以阐明胰蛋白酶作用的全部情况。