11q23転座で発現するMLL融合蛋白による白血病幹細胞化の分子基盤の解明

11q23易位表达的MLL融合蛋白阐明白血病干细胞形成的分子基础

基本信息

批准号：
06J10238
负责人：
小埜良一
金额：
$ 0.77万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J10238/
关键词：
MLL 急性白血病 11q23転座

项目摘要

本研究では、最近提唱されている白血病幹細胞の概念にも鑑みながら、MLL融合蛋白を発現する11q23転座型白血病発症の分子基盤の整備を目指して、レトロウイルスやトランスジェニックマウスを用いて、MLL融合蛋白発現による自己複製、分化、増殖能への影響をin vitroでの培養系における検討や、in vivoでの骨髄移植モデル系を用いた検討により、解析を行うことが目的である。本年度は、マウスの造血細胞を種々の表面抗原の組み合わせで純化する系を立ち上げて、その精度を確認した。極めて高力価なレトロウイルスを作成し、通常遺伝子導入が困難な造血幹細胞においても効率的導入を行う系の樹立にも成功したが、MLL融合遺伝子の導入においては、その全長の大きさや細胞毒性に伴う制約の克服が困難であった。従って、トランスジェニックマウス作成によって遺伝子発現した骨髄細胞を得られるようにする方向で、現在検討中である。一方、in vitroでサイトカイン刺激下のコロニーアッセイにおける分化能や液体培地での増殖能の検討、細胞周期の解析等や、マウスの骨髄移植モデルを用いてin vivoでの腫瘍形成能を解析するための基礎実験も行ってきた。今後は、cDNAマイクロアレイ解析等も用いて、白血病幹細胞の発生や維持に関わる遺伝子群の同定にも、着手する予定である。

在本研究中，我们旨在开发表达MLL融合蛋白的11q23易位白血病发病的分子基础，同时考虑到最近提出的白血病干细胞的概念。本研究的目的是分析融合蛋白的作用。通过体外培养系统和体内骨髓移植模型系统表达自我更新、分化和增殖能力。今年，我们建立了一个使用各种表面抗原组合纯化小鼠造血细胞的系统，并证实了其准确性。我们创建了一种极高滴度的逆转录病毒，并成功建立了一种将基因有效转入造血干细胞的系统，而造血干细胞通常很难转染，因此很难克服与此相关的限制。因此，我们目前正在研究通过创建转基因小鼠获得表达基因的骨髓细胞的可能性。另一方面，我们还进行了细胞因子刺激下的集落分析中的分化能力、液体培养中的增殖能力、细胞周期分析等的体外研究，以及使用小鼠骨髓移植模型的体内致瘤性分析。。未来，我们计划利用cDNA微阵列分析和其他方法来鉴定参与白血病干细胞发育和维持的基因组。