ヒトSLCO1B1遺伝子発現量の個人差および発現調節機構に関する研究

人类SLCO1B1基因表达水平个体差异及表达调控机制研究

• 批准号: 18890044
• 负责人: 降幡 知巳
• 金额: $ 1.68万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890044/
• 关键词: SLCOIBI; PPARalpha; 発現調節機構; 薬物トランスポーター; SLCO1B1; 個人差; 発現調節

Organic anion transporting polypeptide 1B1(OATP1B1, gene symbol SLCO1B1)は,多くの薬物の肝臓への取り込みに関与しているトランスポーターである。本研究ではSLCO1B1遺伝子の発現調節機構におけるperoxisome proliferator-activated receptor(PPAR)αの関与を明らかにすることを目的として検討をおこなった。SLCO1B1遺伝子5'上流約-2kbpを組み込んだレポーターコンストラクト,HepG2細胞を用いてレポータージーンアッセイをおこなったところ,PPARαおよびretinoid Xreceptor(RXR)αを発現させた細胞において,ciprofibrate 30μM添加により,コントロールと比較して約5.6倍の転写活性化が認められた。次にディリーションアッセイをおこなったところ,SLCO1B1遺伝子5'上流-120/-103の17bpの領域を欠失させたコンストラクトではPPARαによる転写活性化が消失した。また,この17bpの領域内に4ケ所の変異を導入したコンストラクトではPPARαによる転写活性化が消失した。これらの結果より,PPARα応答領域はSLCO1B1遺伝子5り上流-120/-103の17bpであると考えられた。さらにヒト肝組織を用いてクロマチン免疫沈降法をおこなったところ,in vivoにおいてもPPARαはSLCO1B1遺伝子5'上流-120/-103の領域付近にDNAと直接または間接的に相互作用していることが明らかとなった。以上の結果より,PPARαはSLCO1B1遺伝子5'上流-120/-103の17bpの塩基配列を介して肝臓におけるSLCO1B1遺伝子の発現制御に関与していることが明らかとなった。

有机阴离子运输多肽1B1（OATP1B1，基因符号SLCO1B1）是参与许多药物肝脏摄取的转运蛋白。进行这项研究的目的是阐明过氧化物体增殖物激活受体（PPAR）α在SLCO1B1基因表达调节机理中的参与。当使用HEPG2细胞进行报告基因测定时，将大约2 kbp融合了SLCO1B1基因上游的报道构建体，通过添加30μMCiprofibrate与表达PPARα和Otininoid Xreceptor（RXR）的细胞中的对照相比，观察到转录激活。接下来，进行了讨论测定，并在删除了SLCO1B1基因5'上游120/-103的17 bp区域中消除了PPARα的转录激活。此外，在该构建体中消除了PPARα的转录激活，在该构建体中，在17bp区域内引入了四个突变。这些结果表明，PPARα响应区域为17 bp，上游SLCO1B1基因5 -120/-103。此外，使用人肝组织进行染色质免疫沉淀，并发现PPARα与SLCO1B1基因上游的SLCO1B1基因5'区域附近的DNA直接或间接相互作用。以上结果表明，PPARα通过SLCO1B1基因5'上游-10/-103的17bp核苷酸序列调节肝脏中SLCO1B1基因的表达。

项目成果

ヒトPPARalphaによるSLCO1B1遺伝子の肝特異的発現調節機構

人PPARα对SLCO1B1基因的肝脏特异性表达调控机制

• 发表时间: 2007
• 作者: Satoh T.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Hepatocyte nuclear factor 1 alpha is a factor responsible for the interindividual variation of OATP1B1 mRNA levels in adult Japanese livers

• DOI: 10.1007/s11095-007-9458-2
• 发表时间: 2007-12-01
• 期刊: PHARMACEUTICAL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Furihata, Tomomi;Satoh, Tomomi;Chiba, Kan
• 通讯作者: Chiba, Kan

PPARalphaによるSLCO1B1遺伝子特異的な発現調節機構

PPARα对SLCO1B1基因特异性表达的调控机制

• 发表时间: 2008
• 作者: Furihata T.;et. al.
• 通讯作者: et. al.