The study of resuscitation of down-regulated ion-channels as a novel therapy for ventricular dysfunction

下调离子通道复苏作为心室功能障碍新疗法的研究

基本信息

批准号：
18590788
负责人：
NIWANO Shinichi
金额：
$ 2.23万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18590788/
关键词：
心筋炎電気的リモデリング酸化ストレスイオンチャネル

项目摘要

本研究は、不全心筋がイオンチャネルの発現低下による活動電位延長とCa^<2+>過負荷による心筋傷害の悪循環に陥っていることに着目し、発現の低下したイオンチャネルの再生によって心不全を制御できるか否かを検討することを目的とした。心不全モデルとしてはLewisラットにブタ心筋ミオシンを感作させて作成する自己免疫性心筋炎ラット(EAM)を用い、その急性期(感作後14-21日)に一過性外向きK+チャネル(Ito)の発現低下を主機序とする活動電位延長が起こっていることを確認した。予備研究として、活動電位を短縮する薬物(KATPチャネル開口薬:ニコランジル・メキシレチン)の投与実験を行い、急性期の活動電位短縮と慢性期の心機能改善を確認した。Ito遺伝子(Kv4.2, KChiP2)導入のためのプラスミド(ベクターはPires-hrGFP-1a)を作成し、NIH3T3細胞、oocyteへのItoチャネルのtransfectを確認できたが、Gene-gunによるラット心筋表面への打ち込みでは十分なチャネル発現を得ることが出来ず、心筋の活動電位を変化させるには至らなかった。予備研究において、急性期の活動電位を修飾することで心不全を治療する可能性を示すことが出来たが、Gene-gunによる遺伝子移入には限界があり、今後はチャネルをtransfectした細胞の移植など、チャネル再生のための新たな方法論を検討する必要があると考えられた

这项研究的重点是由于CA^<2+>过载引起的离子通道表达和心肌损伤而导致的动作电位扩展的恶性循环，并旨在研究是否可以通过减少离子通道的再生来控制心力衰竭。作为心力衰竭的模型，我们使用了自身免疫性心肌炎大鼠（EAM），这些大鼠是通过在刘易斯大鼠中敏化猪心肌肌球蛋白而产生的，并证实了动作的潜在延长主要发生在急性期（敏化后的14-21天），而瞬态机制通过瞬态机制被暂时的机制降低，而瞬态机制是由瞬态的外部k+ Channel（ITOC）降低。作为一项初步研究，我们进行了一项使用一种药物的给药实验，该药物缩短了动作电位（KATP通道开启器：Nicolandil Mexiletine），以确认急性期动作电位的缩短和慢性阶段中心脏功能的改善。创建了一个质粒（矢量：PIRES-HRGFP-1A），用于引入ITO基因（Kv4.2，Kchip2），并将ITO通道转染到NIH3T3细胞中，但卵母细胞，卵母细胞，但用Gene-gun植入大鼠心肌表面，无法获得足够的频道表达，并没有改变Myocardium的动作。在一项初步研究中，我们能够证明通过在急性期修饰动作电位来治疗心力衰竭的可能性，但是基因枪基因渗入基因渗入的结果有限，并且人们认为，通道再生的新方法（例如，应在未来被通道转移的细胞移植。