Protein tyrosine phosphorylation in boar sperm capacitation induced by a novel relaxin-like protein

新型松弛素样蛋白诱导公猪精子获能过程中的蛋白酪氨酸磷酸化

基本信息

批准号：
18580280
负责人：
KOHSAKA Tetsuya
金额：
$ 2.57万
依托单位：
Shizuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18580280/
关键词：
Relaxin Testis Sperm Capacitation Phosphorvlation Boar

项目摘要

This research project was planed to elucidate protein tyrosine phosphorylation during boar sperm capacitation and acrosome reaction mediated by relaxin-like protein (seminal relaxin). The outcome of this study as follows.The present study demonstrated that seminal relaxin actually induced boar sperm capacitation and acrosome reaction with high sperm viability. In relaxin-treated boar sperm, the activity of protein tyrosine kinase was increased with progress of the incubation time, which reached a plateau (10U/10^8 cells) at 4 h of incubation. Furthermore, Western blot analysis revealed a specific band of phosphorylated protein corresponding to the molecular size of 30 kDa in the capacitated/acrosome reacted boar sperm induced by relaxin, suggesting that relaxin induces tyrosine phosphorylation in boar sperm. Also proteome analysis characterized it as interesting and unusual. When polyclonal antibody was generated to the recombinant phosphorylated protein-MBP fusion protein expressed in E. coli, immunohistochemical analysis provided clear-cut evidence of the localization of phosphorylated protein in the sperm head and midpiece.

该研究项目计划在野猪精子电容和通过弛豫蛋白样蛋白（精液弛豫）介导的抗蛋白酪氨酸磷酸化和蛋白质磷酸化中。这项研究的结果如下。目前的研究表明，精确的松弛素实际上诱导了公猪的精子电容和高精子生存能力。在接受松弛素治疗的野猪精子中，随着孵育时间的进展，蛋白质酪氨酸激酶的活性增加了，该孵育时间在孵育4小时时达到了平稳的（10U/10^8细胞）。此外，Western印迹分析显示，在电容/Acrosom体中，特定的磷酸化蛋白质对应于30 kDa的分子大小，反应于松弛素诱导的公猪精子，这表明松弛素在Boar精子中诱导酪氨酸磷酸化。蛋白质组分析也将其描述为有趣且不寻常的。当产生对大肠杆菌中表达的重组磷酸化蛋白MBP融合蛋白的多克隆抗体时，免疫组织化学分析提供了明确的证据，证明了精子头和中型中磷酸化蛋白质的定位。

项目成果

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会议论文数量（0）

专利数量（0）

Park EY Identification of epitope on DNA-binding protein expressed in insect cell infected by baculovirus

Park EY 杆状病毒感染昆虫细胞中表达的 DNA 结合蛋白表位的鉴定

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Molecular Biology Reports 33
影响因子：
0
作者：
Suzuki;M.;Kohsaka;T
通讯作者：
T

Effect of relaxin on motility, acrosome reaction and viability of cryopreserved boar spermatozoa

松弛素对冻存公猪精子运动、顶体反应和活力的影响

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Reproductive Medicine and Biology 5
影响因子：
0
作者：
Suzuki;M.;Kohsaka;T;Miah A et al.
通讯作者：
Miah A et al.

Identification of relaxin and its receptor LGR7 in the boar testis

公猪睾丸松弛素及其受体LGR7的鉴定

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Proceedings of 12th AAAP Animal Science Congress XII
影响因子：
0
作者：
Maroyama;K.;Kato;S.;Aoshima;T.;Suchin;Itoh;H.;Yogo;K.;Kawarasaki;T.;Yamada;K.;Kitayama;Y.;Kohsaka;T
通讯作者：
T

Effect of relaxin and IGF-1 on capacitation, acrosome reaction, cholesterol efflux and utilization of labeled and unlabeled glucose in porcine spermatozoa

松弛素和 IGF-1 对猪精子获能、顶体反应、胆固醇流出以及标记和未标记葡萄糖利用的影响