クローン病の大腸炎症局所湿潤T細胞の抗原受容体β鎖可変領域遺伝子再構成の検討

克罗恩病结肠炎症局部浸润T细胞抗原受体β链可变区基因重排的检测

• 批准号: 06770387
• 负责人: 井上 詠
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770387/
• 关键词: クローン病; 大腸粘膜; 粘膜固有層内リンパ球; T細胞受容体

1.クローン病患者の回腸末端病変部および大腸病変部より上皮細胞間リンパ球(IEL)、粘膜固有層内リンパ球(LPL)を分離を試み、回腸末端病変部のIEL、大腸病変部のLPLの細胞株を樹立した。2.クローン病患者の回腸末端病変部のIELを28週から56週培養するとT細胞受容体のうちVβ5.2を有するT細胞が有意に増加していた。3.これらのVβ5.2陽性細胞を多く含むT細胞株は高γインターフェロン産生能とredirected cytotoxicity assayにおける高い細胞障害活性を有しており、局所の活性化したIELがγインターフェロンを介してマクロファージの集族、活性化をおこしていることが示唆された。4.super antigenとして知られている各種のStaphylococcal enterotoxin(SE)を分離直後のIELに添加し、^3H-Thymidin uptakeにより増殖活性を調べると、SEC1、SEDにより増殖活性が上昇することが示された。5.大腸病変部のLPLでVβ1〜Vβ20のプライマーを用いてRT-PCR法によりT細胞受容体のVβの偏りを検討すると、特定のVβに偏った発現は認められず、むしろ2〜3個のVβで発現が認められないほかはすべてのVβが発現していた。6.大腸病変部のLPLの細胞株よりLPLのT細胞クローンの作製を試みたが、今回の系ではクローン化に成功し得なかった。現在抗CD3交代などで刺激してLPLのT細胞クローンを作製中で、これを用いて各クローンでのVβの発現、および各種super antigenを用いた増殖能の検討とVβの発現との関連を検討中である。

1.尝试从克罗恩病患者的回肠末端和结肠病变中分离上皮间淋巴细胞(IEL)和固有层淋巴细胞(LPL)，建立细胞系。 2.克罗恩病患者回肠末端病变的IEL培养28～56周后，T细胞受体中带有Vβ5.2的T细胞明显增加。 3.这些含有大量Vβ5.2阳性细胞的T细胞系在重定向细胞毒性试验中具有高γ-干扰素产生能力和高细胞毒活性，并且局部活化的IEL通过γ-干扰素诱导巨噬细胞活化。发生。 4.当将被称为超级抗原的各种葡萄球菌肠毒素(SE)添加到分离的IEL中并通过^3H-胸苷摄取检查增殖活性时，表明SEC1和SED Ta增加了增殖活性。 5. 当使用引物 Vβ1 至 Vβ20 在结肠病变的 LPL 中通过 RT-PCR 检查 T 细胞受体 Vβ 的偏向时，没有观察到特定 Vβ 的偏向表达，而是 2 至 3 个。除了其中未观察到表达的Vβ。 6.我们尝试从结肠病变的LPL细胞系中创建LPL T细胞克隆，但我们无法使用该系统成功克隆它。目前，我们通过抗CD3交替等刺激LPL T细胞克隆，并使用它们来检查每个克隆中Vβ的表达、使用各种超级抗原的增殖能力以及Vβ表达之间的关系。目前正在考虑中。